紫花牡荆素诱导结肠癌干细胞样细胞凋亡作用的研究

【摘要】目的研究多甲氧基黄酮即紫花牡荆素(casticin，CAS)诱导源自人结肠癌HCT116细胞系肿瘤球形成细胞即结肠癌干细胞样细胞(coloncancerstemcelllikecells,CCSLCs)凋亡作用。探讨CAS诱导CCSLCs凋亡是否涉及其降低细胞Akt蛋白磷酸化水平作用。方法体外培养人结肠癌HCT-116细胞，干细胞条件培养基成球培养法分离和富集CCSLCs为受试对象。采用肿瘤球形成法检测不同浓度CAS对CCSLCs自我更新的影响。碘化丙啶(propidiumiodide,PI)染色流式细胞术(flowcytometry,FCM)定量分析CAS对CCSLCs细胞凋亡率的影响。DNA琼脂糖凝胶电泳观察CAS对CCSLCs细胞DNA核小体间断裂的影响。荧光标记CD133抗体FCM分析CAS对CCSLCs干细胞标志物CD133表达的影响。最后，采用WesternBlot分析CAS对CCSLCs细胞Akt蛋白磷酸化水平的影响。结果体外培养和扩增人结肠癌HCT116细胞系细胞，采用干细胞条件培养基悬浮培养10天，细胞呈典型非粘附三维结肠癌肿瘤球体生长。肿瘤球形成法检测结果显示，在5.0～10.0μM浓度范围内，CAS以浓度依赖方式减少CCSLCs的肿瘤球数目(P＜0.05)。PI染色FCM分析结果表明CAS(5.0和10.0μM)增加CCSLCs凋亡率，呈浓度依赖趋势(P＜0.05)。CAS(5.0和10.0μM)处理CCSLCs24小时，DNA琼脂糖凝胶电泳呈现核小体间DNA断裂的梯形条带图谱。荧光标记CD133抗体FCM分析结果发现CAS以浓度依赖方式降低干细胞标志蛋白CD133表达(P＜0.05)。WesternBlot检测提示CAS抑制CCSLCs细胞Akt蛋白磷酸化，成浓度依赖性(P＜0.05)。结论1.CAS具有抑制CCSLCs自我更新及诱导CCSLCs凋亡作用。2.CAS可能通过抑制细胞Akt蛋白磷酸化进而抑制CCSLCs的肿瘤干细胞特性。
【作者】黄丽萍；
【导师】曾斌；
【作者基本信息】南华大学，临床医学、内科学，2012，硕士
【关键词】结肠癌；结肠癌干细胞样细胞；紫花牡荆素；细胞凋亡；自我更新；

【参考文献】
[1]陈业.水泥基材料氯离子渗透性研究[D].大连海事大学,交通运输工程,2013,硕士.
[2]崔建明.多因素身份认证协议及基于智能卡的实现研究[D].华东师范大学,微电子学与固体电子学,2013,博士.
[3]相金,任真,韦莹,杨俊柱,张胜义.硒/氧化石墨烯/二氧化钛复合薄膜的制备及光电转换性质[J].化学研究,2013,01:30-35.
[4]刘志慧.内蒙古四子王旗北部构造变形特征及演化[D].中国地质大学（北京）,构造地质学,2014,硕士.
[5]陈雪.TRADUCTION LIBRE DANS LE RESPECT DU PRINCIPE DE FIDéLITé[D].西安外国语大学,法语语言文学,2014,硕士.
[6]马翔龙.经济金融化分析[D].吉林大学,公共管理,2012,硕士.
[7]袁志云,孔令洪,王成林.频谱分解技术在储层预测中的应用[J].石油地球物理勘探,2006,S1:11-15+142-143.
[8]何良,刘皓,刘扬礼,刘瑞芳,曹君慈,叶军.PWM变频驱动电机轴电压与轴电流的测试方法[J].环境技术,2015,02:10-15.
[9]周斌,鲁国刚,黄国方,沈健.基于线性Lagrange插值法的变电站IED采样值接口方法[J].电力系统自动化,2007,03:86-90.
[10]钟丹丹,严俊.新型炭材料的表面电接枝及其应用[J].化工时刊,2012,02:35-37+46.
[11]汪云云.城市个体工商户社会资本研究[D].大连理工大学,思想政治教育,2013,硕士.
[12]邓捷.超细碳酸钙的形貌控制及改性工艺[D].华东理工大学,材料化学工程,2013,硕士.
[13]王卫东.未来的数字医院系统及其关键技术[J].医疗设备信息,2004,07:1-4.
[14]郭政辉.基于JSP的学生信息管理系统的设计与开发[D].吉林大学,软件工程,2014,硕士.
[15]阳永宪.产妇产后早期认知功能的影响因素及分析[D].遵义医学院,麻醉学（专业学位）,2014,硕士.
[16]陈晓燕.论唐诗日译的不可能性[D].沈阳师范大学,外国语言学及应用语言学,2013,硕士.
[17]李林.基于Android系统的手机键盘驱动设计与实现[D].西安电子科技大学,计算机系统结构,2012,硕士.
[18]赵明旺.同阶线性系统在Kharitonov空间的同时镇定[J].自动化学报,1997,02:111-114.
[19]陈权威.虚拟机控制系统的研究与实现[D].湖南大学,软件工程,2010,硕士.
[20]李国平,赵月华,张挨表.列车尾部安全防护装置集中管理系统的研究[J].中国铁路.2000(11)
[21]霍浩然.大鼠弥漫性轴索损伤模型中GPR17的表达变化及意义[D].河北医科大学,外科学,2014,硕士.
[22]吕丽莉.营口市农业工程学校数控专业工业实践项目绩效考核研究[D].吉林大学,工业工程,2014,硕士.
[23]樊国庆.基于AHP-熵权法的网络媒体公益组织形象传播评估研究[D].华中师范大学,传播学,2013,硕士.
[24]白树林,赵云红.石墨烯热学性能及表征技术[J].力学与实践,2014,05:688.
[25]尹松,周永权,李陶深.数据聚类方法的研究与分析[J].航空计算技术,2005,01:63-66.
[26]费爱蓉.基于贝叶斯方法的Web服务分类的研究[D].合肥工业大学,计算机应用技术,2004,硕士.
[27]项利国.基于网络的农业机械装备管理信息系统的研究与实现[D].浙江大学,2004.
[28]王巧.具有寄生虫感染的食饵—捕食者模型的研究[D].兰州理工大学,应用数学,2014,硕士.
[29]胡文波.农村基层党组织在农业科技推广中的功能研究[D].湖南农业大学,农业科技组织与服务,2012,硕士.
[30]刁文晶.高职院校日语专业跨文化交际能力的培养[D].吉林财经大学,外国语言学及应用语言学,2014,硕士.
[31]李敏.高职生英语阅读焦虑调查研究[D].华中师范大学,英语语言文学,2014,硕士.
[32]王明蔚.“诗言志”到“诗缘情”的嬗变研究[D].青海师范大学,中国古代文学,2012,硕士.
[33]马芳芳.基于RTW的船舶电站实时仿真系统的研究[D].大连海事大学,控制理论与控制工程,2013,硕士.
[34]肖冰,王伟,邓飞其.一种多维关联规则算法的研究[J].重庆工商大学学报(自然科学版),2005,04:339-342+389.
[35]袁文强.斜独塔斜拉桥施工控制分析[D].西南交通大学,桥梁与隧道工程,2014,硕士.
[36]张惠莲.90年代以来韩中女性成长小说比较研究[D].辽宁大学,文艺学,2014,博士.
[37]王敬涵.瞿秋白辩证法思想研究[D].渤海大学,马克思主义中国化研究,2013,硕士.
[38]于文娟.自然静水蓄热保温供暖技术研究[D].哈尔滨工业大学,供热、供燃气、通风及空调工程,2013,硕士.
[39]张颖.虾夷马粪海胆体腔液免疫因子及吞噬细胞活性的研究[D].大连海洋大学,水生生物学,2014,硕士.
[40]梁从伟.我国财政转移支付制度若干法律问题研究[D].兰州商学院,经济法学,2013,硕士.
[41]别倩雯.新型改性高分子絮凝剂的制备方法及其性能研究[D].兰州理工大学,环境工程,2014,硕士.
[42]李梓.湖南现行人口政策问题研究[D].湖南师范大学,社会学,2013,硕士.
[43]何宴辉.几类混沌系统的控制与应用研究[D].燕山大学,控制理论与控制工程,2003,硕士.
[44]王春环.产业转移对承接地企业的业绩影响[D].复旦大学,管理科学,2012,硕士.
[45]张晓瑞,王振波.基于PP-DEA模型的区域城镇化发展差异的综合评价[J].中国人口.资源与环境,2012,02:130-135.
[46]苏方远,游从辉,杨全红.锂离子电池用石墨烯三维导电网络[A].中国材料研究学会.2011中国材料研讨会论文摘要集[C].中国材料研究学会:,2011:1.
[47]张翔.情感化图形符号在手机界面中应用研究[D].首都师范大学,视觉传达设计,2014,硕士.
[48]张月香.不同成就目标玩家在教育游戏中的学业情绪分析[D].南京师范大学,教育技术学,2012,硕士.
[49]钱晨曦.改进的门单元多输入跳变电流源模型及其在SSTA中的应用[D].复旦大学,微电子学与固体电子学,2012,硕士.
[50]孙念龙.结肠癌18F-FDG PET/CT的SUV值与临床特征及肿瘤标志物的相关研究[D].吉林大学,临床医学,2014,硕士.