三株A型流感病毒致小鼠肥大细胞系P815凋亡的研究

【摘要】本实验室前期的研究证明,在A型流感病毒感染过程中,肥大细胞可被H5N1激活,释放活性介质,引起感染组织炎性反应,并加剧感染组织的病理损伤：抑制肥大细胞活性,可明显减轻靶器官的病理损伤,减少感染小鼠的死亡率。本研究以小鼠肥大细胞系P815为研究材料,观察了A型流感病毒感染肥大细胞后细胞凋亡的发生情况与机理。本研究采用透射电镜观察TUNEL染色,对攻毒之后的肥大细胞进行了检测,结果证明H1N1(A/WSN/33).H5N1(A/Chicken/Henan/I/04)及H7N2(A/Chicken/Hebei/2/02)三种亚型的流感病毒均可诱导肥大细胞凋亡。采用磷脂酰丝氨酸染色法及后续的流式细胞仪分析,比较了三株不同亚型流感病毒诱导肥大细胞的凋亡比率,结果显示三株病毒诱导肥大细胞凋亡的能力为H5N1>H1N1>H7N2。此外,本研究采用了WesternBlot,Caspase抑制实验和磷脂酰丝氨酸染色法及后续的流式细胞仪分析,对A型流感病毒诱导肥大细胞凋亡的信号通路进行了研究。结果提示病毒主要通过线粒体介导的内源性通路诱导细胞凋亡的发生,而死亡受体介导的通路的活化在病毒诱导的细胞凋亡中比较微弱。通过对Bcl-2家族中两个促凋亡蛋白Puma及Bim的检测,我们观察到促凋亡蛋白Puma与Bim表达水平上调,这暗示着它们在A型流感病毒感染诱导肥大细胞凋亡的过程中可能发挥了重要作用。
【作者】刘博；
【导师】汪明；孙仑泉；胡艳欣；
【作者基本信息】中国农业大学，预防兽医学，2014，硕士
【关键词】A型流感病毒；细胞凋亡；肥大细胞；信号通路；

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