S-腺苷-L-甲硫氨酸的分离纯化及其硫酸盐制备的研究

【摘要】S-腺苷-L-甲硫氨酸(S-adenosyl-L-methionine,简称SAM,SAMe或AdoMet)是一种重要的中间代谢产物,广泛存在于各种生物体中,也是人体内一种重要的生理活性物质。本文主要研究了破碎细胞抽提SAM的方法；SAM的分离纯化；SAM硫酸盐的制备；SAM硫酸盐的稳定性。对破碎细胞抽提SAM的方法进行研究表明,采用甲酸进行破碎抽提效果最好,优化得出最佳破碎提取条件：甲酸浓度：0.5mol/L,甲酸用量：1.25BV发酵液体积,破碎时间：90min。SAM提取率以高氯酸的破碎率为1,能达到95%以上。采用离子交换法从细胞提取液中分离纯化SAM。此法相对于传统的使用苦味酸,苦酮酸选择沉淀SAM的方法,提高了SAM的回收率,而且减小了操作的危险性和对环境的污染。研究得出SAM提取液在D113弱酸性阳离子交换树脂上的SAM最佳上柱初始pH值为5.0。以硫酸作为洗脱剂洗脱SAM,得出最佳洗脱条件为0.2mol/L的硫酸,流速2BV/h。SAM洗脱效率为90.3%。采用有机反相沉淀的方法制备SAM硫酸盐,优化SAM硫酸盐的结晶工艺。通过实验得到,选用80%甲醇浓度比例,甲醇用量5BV进行结晶,该条件下结晶状况最好。SAM硫酸盐回收率达到70%以上,产品纯度达到91.05%。SAM硫酸盐的稳定性仍受pH和温度的影响。但温度对SAM硫酸盐的稳定性影响较大,随温度升高,降解速率明显加快,损失量显著增加。因此,SAM硫酸盐的保存应在低温(0℃)下保存。本文旨在完善SAM分离纯化工艺,提高SAM破碎提取率,优化整条工艺流程,减少SAM损失,为SAM工业化应用打下良好基础。
【作者】杨羽辉；
【导师】于平；
【作者基本信息】浙江工商大学，生物化工，2014，硕士
【关键词】S-腺苷-L-甲硫氨酸；SAM；细胞破碎；D113弱酸性阳离子交换树脂；离子交换；分离纯化；SAM硫酸盐；SAM硫酸盐的稳定性；

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