连翘叶片多糖的提取、分离纯化及抗氧化性研究

【摘要】多糖是广泛存在于动植物及微生物中的一类天然高分子化合物。目前，多糖的生物学功能研究已经逐渐成为当今医药等领域研究的热点。本文以具经济价值、医药价值和生态价值的连翘叶片为实验材料，对连翘叶片多糖的提取、分离纯化工艺、结构分析及体外抗氧化性等方面进行了较为系统的研究，主要研究结果如下：(1)采用蒽酮-硫酸法测定连翘叶片多糖(FLP)含量的重现性试验RSD值为2.07%(n=5)，加样回收率为97.95%，RSD值为3.30%(n=5)。测得连翘叶片中多糖含量为：4.18%。(2)在单因素试验的基础上，利用响应面分析方法优化了超声波辅助法提取连翘叶片多糖工艺条件；其最佳提取条件为：水料比23:1(mL/g)，提取时间31min，提取温度为70℃。在此条件下提取两次，多糖得率可达7.87%。(3)采用Sevag法研究了连翘叶片多糖中蛋白质的脱除条件；反复脱除蛋白4次，蛋白脱除率可达72.48%；通过静态吸附试验比较AB-8、X-5、D101、D4020这4种大孔吸附树脂的脱色效果，以树脂X-5的脱色效果最佳，并通过单因素试验和正交试验研究了多糖液pH值、树脂添加量、脱色时间和震荡转速四个因素对脱色效果的影响，优化了连翘叶片多糖最佳脱色工艺条件：多糖液pH值为6，树脂添加量为4g，脱色时间为1h，震荡转速为100r/min。在此条件下，连翘叶片多糖的脱色率为87.22%，多糖回收率可达86.31%。(4)对脱蛋白、脱色后得到的连翘叶片粗多糖，以蒸馏水和不同浓度的氯化钠溶液为洗脱剂，采用DEAE-Cellulose52柱层析分离，获得两个主要多糖组分FLP-1（蒸馏水洗脱组分）与FLP-2（0.5mol/L氯化钠洗脱组分）。(5)对FLP-1和FLP-2进行理化性质分析及紫外色谱初步解析，结果表明FLP-1和FLP-2中均不含淀粉、酚类物质、还原糖及核酸，且FLP-1不含蛋白质，FLP-2可能是一种糖蛋白复合物；红外光谱解析进一步显示FLP-1与FLP-2均具有多糖类物质的特征吸收峰。其中，FLP-1为含有甘露糖的呋喃糖苷，FLP-2为酸性的糖蛋白复合物。(6)以Vc为对照，通过体系(羟基自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基、还原能力)比较了连翘叶片粗多糖FLP及不同级分多糖FLP-1和FLP-2的体外抗氧化活性，结果表明FLP、FLP-1、FLP-2均具有一定的清除羟基自由基、DPPH自由基和一定的还原能力，且随着多糖浓度的增加清除自由基和还原能力逐渐加强，FLP对自由基的清除能力和还原能力高于FLP-1和FLP-2，但作用效果不及Vc；FLP、FLP-1、FLP-2对超氧阴离子自由基均无清除作用，反而呈现了一定的促氧化作用。
【作者】吕建平；
【导师】闫桂琴；
【作者基本信息】山西师范大学，生态学，2014，硕士
【关键词】连翘叶片；多糖；提取；分离纯化；抗氧化性；

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