体内外研究18β-甘草次酸对MDSC免疫抑制功能的影响

【摘要】目的肝细胞癌(Hepatocellular.carcinoma,HCC)是临床过程中多见的恶性肿瘤,它的恶性程度高,难以控制,诊疗过程中不易被发现,病情进展快速,对人们的健康影响严重。近年来,中国肝癌的预防和治疗有了长足的发展,其中肝癌的免疫诊疗及预防的研究也不断深入。最近研究结果发现,在肿瘤模型小鼠的血液、脾脏和肿瘤中,都存在大量的髓系来源的抑制细胞(myeloid-derivedsuppressorcell,MDSC),而且在临床肿瘤患者中,对其血液和肿瘤组织进行检测,结果发现大量的MDSC。MDSC的大量积累,抑制了机体免疫功能,促进肿瘤细胞逃脱免疫细胞的攻击,进而使肿瘤发生侵袭和转移。本文通过体内外实验,研究18β-甘草次酸(GA)对肝癌微环境中MDSC增殖抑制的作用及其机理。为GA抗肝癌作用新靶点的阐明提供了新的思路,同时也为后续开展MDSC免疫学及细胞机制的研究提供实验数据和理论支持。实验方法鼠源性肝癌细胞H22,用注射器将其打入BALB/c雄性小鼠肝脏内,建立小鼠原位模型,手术10天后断颈处死小鼠。在细胞实验中,通过流式分选技术分选模型小鼠脾脏中MDSC细胞,GA处理MDSC24小时后,流式检测MDSC精氨酸代谢酶1(Arg-1)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及活性氧(ROS)的表达,通过共培养实验,流式细胞术检测MDSC对T细胞抑制的影响及作用机制。在动物实验中,将动物随机分为三个组别：正常组、模型组、GA组。收集三组小鼠的脾脏、肝脏及肿瘤,通过流式细胞技术检测各组小鼠脾脏和肿瘤中各免疫细胞的表达情况。结果构建小鼠原位肝癌模型并从脾脏中成功分选出MDSC;在细胞实验中,GA均能下调MDSC中Arg-1、iNOS和ROS的表达；MDSC能抑制T细胞的增殖,经GA处理MDSC后,其能明显抑制T细胞增殖。在动物实验中,虽然GA组较模型组脾脏和肿瘤中MDSC及其亚型的表达均明显上调,但MDSC功能中Arg-1、iNOS和ROS的表达是下调的。同时GA组中NK细胞的表达较模型组明显升高。结论体内外实验均表明,GA能明显下调MDSC功能中Arg-1、iNOS和ROS的表达,同时GA能上调小鼠原位移植肝癌模型中NK细胞的表达,这为后面研究MDSC的相关机制提供了实验证据。
【作者】吴端；
【导师】王效民；
【作者基本信息】厦门大学，外科学，2014，硕士
【关键词】18β-甘草次酸；髓系来源抑制细胞；肝癌；

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