不同浓度RANKL对破骨细胞中NFATcl,c-Src和RANK基因表达的影响

【摘要】目的：体外实验观察不同浓度核因子KB受体活化因子配体(RANKL)对大鼠破骨细胞活化T细胞核因子1(NFATcl)、原癌基因c-Src、核因子KB受体活化因子(RANK)mRNA表达的影响；研究破骨细胞中活化T细胞核因子1、原癌基因c-src和核因子KB受体活化因子在骨质疏松中的发病过程中基因的表达是否与核因子KB受体活化因子配体的浓度存在相关性。方法：实验采用5周龄SD大鼠获取骨髓基质细胞(BMSC),加入集落刺激因子(M-CSF)及RANKL体外诱导培养破骨细胞,在实验过程中每组分别加入低、中、高(50ng/ml、75ng/ml、100ng/ml)3种浓度的RANKL及均加入M-CSF(25ng/ml),实验对照组加入RANKL(0ng/ml)及M-CSF(25ng/ml);培养7天后,采用实时荧光定量PCR法检测NFATcl、c-Src、RANKmRNA的表达。结果：NFATcl、c-Src、RANK基因表达与RANKL的浓度呈依赖性,与实验对照组M-CSF(25ng/ml)+RANKL(0ng/ml)组相比,中、高浓度的RANKL均促进了NFATcl及c-SrcmRNA(p<0.01,p<0.01)的表达；与M-CSF(25ng/ml)+RANKL(0ng/ml)组相比,低、中、高浓度的RANKL均促进了RANKmRNA(p<0.01,p<0.01和p<0.01)的表达；与M-CSF(25ng/ml)+RANKL(50ng/ml)组相比,中、高浓度的RANKL均促进了NFATclmRNA(p=0.013,p<0.01)的表达；与M-CSF(25ng/ml)+RANKL(50ng/ml)组相比,中、高浓度的RANKL促进了c-SrcmRNA(p<0.01,p<0.01)的表达；与M-CSF(25ng/ml)+RANKL(75ng/ml)组相比,高浓度的RANKL均促进了NFATcl,c-Src和RANK(p<0.01,p<0.01和p<0.01)的基因表达。结论：RANKL可通过促进了NFATc1,c-Src和RANKmRNA的表达并促进破骨细胞的分化、成熟,且表现出一定的浓度依赖性。RANKL作为OPG/RANK/RANKL信号传导通路中的因子,NFATc1,c-Src和RANK作为其下游及调控因子,调控了破骨细胞的分化、成熟,在骨质疏松的发病机制中发挥着重要的作用。
【作者】张永晟；
【导师】陈健；
【作者基本信息】厦门大学，内科学，2014，硕士
【关键词】骨质疏松；活化T细胞核因子1；原癌基因c-Src；核因子κB受体活化因子；核因子κB受体活化因子配体；

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