Importin13基因的转录调控研究

【摘要】在真核生物中,转录起始复合物组分,绝大多数转录因子和调控因子以及细胞周期调控蛋白,它们作为参与和保障细胞正常生命活动,发育和分化所必须的生物大分子,都需要在正确的时间和空间进出细胞核,而这个过程主要是由Importinβ家族参与介导完成的。Importinβ家族蛋白在核质转运中起到了极其重要的作用,因此,Importinβ家族蛋白自身的表达调控也成为了调节核质转运的一种重要方式。Importin13(IPO13)作为这个家族的成员,也是目前所知的在哺乳动物细胞中罕见的能够双向转运底物蛋白的转运受体,对其转录调控的研究具有独特的意义。为了研究IPO13的转录调控,在本研究中,我们分析了一些转录因子与IP013的表达分布,并利用被广泛使用的JASPAR数据库和MAPPER数据库预测了在IPO13启动子上可能的转录因子结合位点。我们构建了含IPO13(-2000～-+162)和IPO13(-433～+162)的荧光素酶报告质粒,通过一系列荧光素酶活性测定实验,我们确定了MEF2C能够与IPO13启动子上E-BOX元件结合。随后,我们使用ChIP实验和EMSA实验验证了此结论。之后我们考虑MEF2C能否促进内源IPO13的表达。于是在293T细胞内过表达了MEF2C,结果证明MEF2C确实能够促进IPO13的表达。这为今后研究其他Importinβ家族成员的转录调控提供了一个良好的模式,并且为了解IPO13是如何参与不同细胞在不同阶段的生命活动奠定了良好的基础。
【作者】王炜；
【导师】陶涛；
【作者基本信息】厦门大学，细胞生物学，2014，硕士
【关键词】Importin13(IPO13)；MEF2C；转录调控；

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