丝胶对2型糖尿病大鼠海马损伤的保护作用

【摘要】糖尿病是危害人类健康的代谢紊乱性疾病,其并发症可严重影响患者的生命质量。糖尿病时海马损伤可引起以获得性认知和行为缺陷为特征的认知功能障碍,因此糖尿病海马损伤的防治成为糖尿病及其并发症研究领域的重要课题。丝胶为茧丝中含有多种生物活性的水溶性蛋白质,约占蚕茧的30%,但在缫丝时常被废弃,学者们一直在探讨如何有效利用如此大量的优质蛋白质。目前,丝胶在治疗糖尿病方面的作用,仅有少数国内学者进行了初步探讨,发现其可有效降低血糖。本研究采用链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)致2型糖尿病大鼠模型,探讨丝胶对2型糖尿病大鼠海马损伤的保护作用,为防治糖尿病海马损伤开辟新途径。第一部分丝胶对2型糖尿病大鼠海马HO-1表达的影响目的：观察丝胶对大鼠海马血红素加氧酶1(hemeoxygenase-1,HO-1)表达的影响。探讨丝胶对2型糖尿病大鼠海马神经元的保护作用及可能机制。方法：1.48只SD大鼠随机分为4组,正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组,每组12只。糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组大鼠均采用STZ连续腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型。待模型成功建立后,模型组大鼠不再作任何处理；丝胶治疗组大鼠给予丝胶灌胃(2.4g/kg/d),阳性对照组大鼠给予二甲双胍(55.33mg/kg/d)灌胃,时间均为35天。2.采用葡萄糖氧化酶法检测各组大鼠的血糖(bloodglucose,BG)。3.采用WesternBlotting法检测海马HO-1蛋白的表达。4.采用RT-PCR法检测海马HO-1mRNA的表达。结果：1.各组大鼠的BG.糖尿病模型组大鼠的BG为(29.45±4.82)mmol/L明显高于正常对照组大鼠(P<0.01)；丝胶治疗组、阳性对照组大鼠的BG分别为(13.20±4.09)mmol/L、(13.18±2.30)mmol/L,明显低于糖尿病模型组大鼠(P<0.01)；且丝胶治疗组与阳性对照组比较无明显差异(P>0.05)。2.糖尿病模型大鼠海马HO-1蛋白及mRNA的表达均明显高于正常对照组大鼠(P<0.01)。且丝胶治疗组与阳性对照组比较无明显差别(P>0.05)。结论：丝胶可通过下调海马中HO-1的表达,减轻海马神经元损伤,发挥对糖尿病海马损伤的保护作用。第二部分丝胶对2型糖尿病大鼠海马GH/IGF-1轴的作用目的：探讨丝胶对2型糖尿病大鼠海马生长激素(growthhormone,GH)/胰岛素样生长因子-1(insulin-likegrowthfactor-1,IGF-1)轴的作用。方法：1.48只SD大鼠随机分为4组,正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组,每组12只。糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组大鼠均采用链尿佐菌素(Streptozotocin,STZ)连续腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型。待模型成功建立后,模型组大鼠不再作任何处理；丝胶治疗组大鼠给予丝胶灌胃(2.4g/kg/d),阳性对照组大鼠给予二甲双胍(55.33mg/kg/d)灌胃,时间均为35天。2.采用ELISA法检测各组大鼠血清GH和IGF-1水平。3.采用WesternBlotting法检测海马GH和生长激素受体(growthhormonereceptor,GHR)蛋白的表达。4.采用RT-PCR法检测海马GH.GHR和IGF-1mRNA的表达。结果：1.各组大鼠血清GH和IGF-1水平：糖尿病模型大鼠GH水平为(2.56±1.13)ng/ml,明显高于正常大鼠(P<0.05)；IGF-1水平为(520.20±121.81)ng/ml,明显低于正常大鼠(P<0.01)。丝胶治疗组、阳性对照组大鼠GH水平分别为(1.36±0.57)ng/ml.(1.37±0.64)ng/ml,均明显低于糖尿病模型组大鼠(P<0.01)；IGF-1水平分别为(981.10±180.88)ng/ml、(1021.10±198.32)ng/ml,均明显高于糖尿病模型组大鼠(P<0.01)；且丝胶治疗组与阳性对照组比较无明显差异(P>0.05)。2.各组大鼠海马GH的表达：糖尿病模型组大鼠海马GH蛋白及mRNA的表达均明显高于正常组大鼠(P<0.01)；丝胶治疗组和阳性对照组大鼠海马GH蛋白及mRNA的表达明显低于糖尿病模型组大鼠(P<0.01,P<0.05);且丝胶治疗组与阳性对照组比较无明显差异(P>0.05)。3.各组大鼠海马GHR的表达：糖尿病模型组大鼠海马GHR蛋白及mRNA的表达明显低于正常组大鼠(P<0.01)；丝胶治疗组和阳性对照组大鼠海马GHR蛋白及mRNA的表达明显高于糖尿病模型组大鼠(P<0.01,P<0.05)；且丝胶治疗组与阳性对照组比较无明显差异(P>0.05)。4.各组大鼠海马IGF-1的表达：与正常对照组大鼠比较,糖尿病模型组大鼠海马IGF-1mRNA的表达明显下降(P<0.01)；丝胶治疗组、阳性对照组大鼠海马IGF-1mRNA的表达较糖尿病模型组大鼠明显升高(P<0.01)；且丝胶治疗组与阳性对照组比较无明显差异(P>0.05)。结论：1.糖尿病大鼠存在GH/IGF-1轴紊乱,表现为血GH水平升高、IGF-1水平降低,海马GH的表达升高、GHR和IGF-1的表达降低。2.丝胶可通过调节糖尿病时GH/IGF-1轴紊乱,改善海马损伤。第三部分丝胶对2型糖尿病大鼠海马Akt信号转导通路的作用目的：探讨丝胶对2型糖尿病大鼠海马蛋白激酶B(Akt)信号转导通路的作用。方法：1.48只SD大鼠随机分为4组,正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组,每组12只。糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组大鼠均采用链尿佐菌素(Streptozotocin,STZ)连续腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型。待模型成功建立后,模型组大鼠不再作任何处理；丝胶治疗组大鼠给予丝胶灌胃(2.4g/kg/d),阳性对照组大鼠给予二甲双胍(55.33mg/kg/d)灌胃,时间均为35天。2.采用WesternBlotting法检测海马p-Akt、核转录因子kaPPaB(NF-κB)和前凋亡因子Bad(Bcl-XL/Bcl-2associateddeathPromoter)蛋白的表达。3.采用RT-PCR法检测海马p-Akt,NF-κB和BadmRNA的表达。结果：1.各组大鼠海马p-Akt的表达：糖尿病模型组大鼠海马p-Akt蛋白及mRNA的表达均明显低于正常组大鼠(P<0.01)；丝胶治疗组和阳性对照组大鼠海马p-Akt蛋白及mRNA的表达明显高于糖尿病模型组大鼠(P<0.01,P<0.05);且丝胶治疗组与阳性对照组比较无明显差异(P>0.05)。2.各组大鼠海马NF-κB的表达：糖尿病模型组大鼠海马NF-κB蛋白及mRNA的表达明显低于正常组大鼠(P<0.01)；丝胶治疗组和阳性对照组大鼠海马NF-κB蛋白及mRNA的表达明显高于糖尿病模型组大鼠(P<0.01)；且丝胶治疗组与阳性对照组比较无明显差异(P>0.05)。3.各组大鼠海马Bad的表达：与正常对照组大鼠比较,糖尿病模型组大鼠海马Bad蛋白及mRNA的表达均明显升高(P<0.01)；丝胶治疗组与阳性对照组大鼠海马NF-κB蛋白及mRNA的表达较糖尿病模型组大鼠明显降低(P<.01)；且丝胶治疗组与阳性对照组比较无明显差异(P>0.05)。结论：丝胶可通过上调p-Akt,NF-κB的表达,下调Bad的表达,改善糖尿病时海马Akt信号转导通路的异常,发挥对糖尿病海马损伤的保护作用。
【作者】和亚强；
【导师】陈志宏；薛景凤；
【作者基本信息】承德医学院，人体解剖与组织胚胎学，2011，硕士
【关键词】丝胶；糖尿病；海马；血红素加氧酶1；生长激素；胰岛素样生长因子-1；蛋白激酶B；前凋亡因子Bad；

【参考文献】
[1]万炜.基于数据仓库技术的市场分析系统设计与实现[D].清华大学,2004.
[2]张升文,张少仲.数据仓库、数据挖掘和OLAP分析及其应用实例[J].微机发展,2002,01:22-23+28.
[3]谷青.湘电风能研发人员股权激励机制设计[D].武汉科技大学,工商管理,2012,硕士.
[4]杨林.东丽区居民最低生活保障信息管理系统的设计与实现[D].山东大学,软件工程（专业学位）,2013,硕士.
[5]林媛媛.氧化再生纤维素钠盐可吸收止血纱的降解机制研究[D].哈尔滨工业大学,高分子化学与物理,2013,硕士.
[6]柴颖.基于发光功能化纳米金核酸分析探针的新型电致化学发光传感器[D].中国科学技术大学,分析化学,2012,博士.
[7]潘辛育.中国银行间债券市场中做市商的功能研究[D].华东师范大学,世界经济,2004,硕士.
[8]刘荣荣.二次—三次函数方程的Hyers-Ulam-Rassias稳定性[D].青岛大学,基础数学,2013,硕士.
[9]张红宇.肺癌胸水肿瘤浸润淋巴细胞的生物学活性研究及临床应用[D].苏州大学,肿瘤学,2003,硕士.
[10]郭兵.铁酸铋基铁电薄膜的制备工艺及可反向光伏效应研究[D].上海交通大学,材料工程,2013,硕士.
[11]朴馥永,黄阳华.以经济转型跨越“中等收入陷阱”——来自韩国的经验[J].经济社会体制比较,2013,01:1-11.
[12]司旭.吉尔吉斯斯坦国立民族大学孔子学院中国文化传播现状调查[D].新疆师范大学,汉语国际教育,2013,硕士.
[13]王伟,郭戈,柴天佑,寇新民.连铸过程的建模与控制[J].控制与决策,1997,S1:385-390+523.
[14]李晶宇.混合原料对厌氧发酵产气效果影响研究[D].东北农业大学,农业生物环境与能源工程,2013,硕士.
[15]朱挺.低功耗有限状态机的综合与优化研究[D].浙江大学,电路与系统,2004,硕士.
[16]包萨础拉.额尔敦陶克陶及其编辑出版活动之探析[D].内蒙古大学,新闻学,2014,硕士.
[17]李小琴.先秦儒家德育思想及其现代价值[D].扬州大学,思想政治教育,2011,硕士.
[18]孙春杰.无线传感器网络定位技术的研究[D].南京大学,通信与信息系统,2013,硕士.
[19]肖岳.智慧园区建设的研究与探索[D].上海交通大学,电子与通信工程（专业学位）,2012,硕士.
[20]欧阳荣.株洲市高层次人才队伍建设政策研究[D].湖南大学,公共管理,2013,硕士.
[21]张海燕.实时电价的研究[D].太原理工大学,电力系统及其自动化,2004,硕士.
[22]谢刚.城市轨道交通车载二取二平台关键技术的研究[D].西南交通大学,交通运输工程,2013,硕士.
[23]张建友,徐静波,冯剑.浅谈考试方式与方法改革[J].现代物业(中旬刊),2013,02:52-53.
[24]郭振山.陈士铎痰病论治思想研究[D].北京中医药大学,中医医史文献,2013,硕士.
[25]黄荣怀,陈庚,张进宝,陈鹏,李松.关于技术促进学习的五定律[J].开放教育研究,2010,01:11-19.
[26]李科.高能球磨合金化粉末对金刚石工具胎体性能影响的研究[D].华侨大学,机械制造及其自动化,2014,硕士.
[27]芦瑞丹.降钙素原在新生儿感染诊断中的临床价值[D].蚌埠医学院,临床检验诊断学（专业学位）,2013,硕士.
[28]张莹.我国“微博问政”研究[D].新疆大学,行政管理,2013,硕士.
[29]吕心洁.商业银行核心竞争力的确认与计量研究[D].兰州商学院,会计学,2013,硕士.
[30]张年华.学生成绩管理系统的设计与实现[D].吉林大学,软件工程,2014,硕士.
[31]陶梦雨.《茶的故事》“茶也能醉人”部分翻译报告[D].四川外国语大学,翻译（专业学位）,2014,硕士.
[32]梁静.中国工程咨询业发展对策研究[D].武汉理工大学,工商管理,2003,硕士.
[33]宗方伟.雷公藤内酯醇抗炎作用在兔角膜基质炎中的研究[D].吉林大学,眼科学（专业学位）,2013,硕士.
[34]马占菊.拓展训练对大学生社会适应能力影响的研究[D].河北师范大学,体育教育训练学,2012,硕士.
[35]马世喜.面向海岛应用的微型燃机冷热电联供系统优化控制研究[D].哈尔滨工业大学,动力工程,2014,硕士.
[36]葛晓智.煤炭产业集群对黑龙江省煤炭城市经济增长影响的研究[D].哈尔滨工业大学,国际贸易学,2013,硕士.
[37]王明.利辛县招商引资的政策研究[D].安徽大学,公共管理,2012,硕士.
[38]孙国香.1，2，4-三唑[1，5-a]嘧啶-2-磺酰胺类除草剂的合成及筛选[D].浙江工业大学,农药学,2004,硕士.
[39]姚兴华.北店子引黄水闸安全鉴定技术研究与应用[D].山东大学,水利工程（专业学位）,2013,硕士.
[40]黄成群.大股东控制权对股权激励效果影响实证研究[D].哈尔滨工业大学,会计学,2013,硕士.
[41]张继武.中金集团权属公司高管绩效考核改进研究[D].西安科技大学,工商管理,2014,硕士.
[42]杨蕾.cdma2000系统物理层设计与功率控制算法的研究[D].天津大学,信号与信息处理,2004,硕士.
[43]陈莹.毛泽东法治思想研究[D].渤海大学,马克思主义中国化研究,2014,硕士.
[44]王铠尧,肖扬.基于原模图LDPC码的电视频带认知MIMO系统[J].应用科学学报,2014,03:237-245.
[45]郭霖.高中语文作文评改的优化策略研究[D].内蒙古师范大学,学科教学（专业学位）,2013,硕士.
[46]王亚峰.空调房间温度模糊分数阶PID控制器设计及其性能分析[D].兰州理工大学,供热、供燃气、通风及空调工程,2014,硕士.
[47]肖力波.检警关系问题研究[D].中国政法大学,法律,2004,硕士.
[48]毕鹏.“无奈”抑或是“无赖”？[D].华中师范大学,社会学,2013,硕士.
[49]刘俊.盾构隧道施工对邻近桩基的形变影响研究[D].西南交通大学,桥梁与隧道工程,2013,硕士.
[50]袁静,刘召平,方瑞燕,冷文玉,李晓.医学信息的挖掘[J].解放军医院管理杂志,2005,04:305-314.