冻存神经异体移植在大鼠坐骨神经损伤修复中应用的研究

【摘要】骨盆及其周围的软组织是结缔组织肿瘤的好发部位之一,由于早期症状不明显,骨盆恶性肿瘤在发现时己处于中晚期,瘤块较大,与周围组织界限不清。手术是治疗骨盆肿瘤的主要方法,与传统的截肢术相比,骨盆区域的保肢手术显得十分重要。彻底切除肿瘤是开展骨盆保肢手术和治愈恶性肿瘤的条件。而侵犯到股神经或坐骨神经成了治疗骨盆恶性骨肿瘤手术保肢的禁忌症之一,在一定的程度上限制了保肢术的进展。目前采用低温冷冻后进行神经的异体移植,已经得到肯定。本实验通过液态氮冷存降低同种异体神经的免疫原性,作为基础条件,探讨和研究不同长度神经缺损修复后的生理功能,为临床骨盆恶性肿瘤中压迫神经所导致的手术禁忌提供新的思路。目的：本研究通过人工切除坐骨神经的方法建立SD大鼠模型,通过显微外科的方法将不同长度的坐骨神经切除,将原先制备好的冻存同种异体神经进行移植,通过足迹和形态学检测的方法,观察移植后神经的功能,并为临床骨盆恶性肿瘤中压迫神经所导致的手术禁忌提供新的思路。方法：选择60只健康SD大鼠,雌雄各半,随机分为12组,每组5只,其中大鼠异体神经移植分为坐骨神经移植10mm组(A1)、15mm组(A2)、20mm组(A3)、25mm组(A4)；冻存神经移植分为坐骨神经移植10mm组(B1)、15mm组(B2)、20mm组(B3)、25mm组(B4)；自体神经移植分为坐骨神经移植10mm组(C1)、15mm组(C2)、20mm组(C3)、25mm组(C4)。分别测定大鼠的坐骨神经功能指数(sciaticnervefunctionindex,SFI),用以评估其神经功能状态,其中SFI值：-100为完全损伤,0为未损伤；选定在术前和术后12W进行足印检测；测定腓肠肌湿重,记录术侧(右侧)占正常侧(左侧)百分比结果；应用免疫组织化学方法观察移植神经远端坐骨神经轴索中神经微丝蛋白(neurofilamentprotein,NFP)的表达,来测定神经再生的能力。结果：1.各组大鼠SFI：B3组SFI为(-80.49±0.3)C3(-73.27±2.41)差别有统计学意义(P<0.05)。2.各组大鼠腓肠肌湿重(%)：术后12W,A2(25.71±1.90),B2(41.79±6.46),C2(56.78±1.85)差别有统计学意义(P<0.05)；B4(24.62±7.65),C4(30.09±1.52)差别有统计学意义(P<0.05)。3.各组大鼠的NFP：B4(55.33±9.02),C4(682.67±147.80)差别有统计学意义(P<0.05)A3(85.33±36.95),B3(395.00±48.57),C4(682.67±147.80)差别有统计学意义(P<0.05)。4.透射电镜观察结果：A3组中雪旺细胞稀少,胞浆薄,核膜不完整,无髓鞘出现,结缔组织增生明显。B3组中雪旺细胞较少,胞浆稀薄,核膜较完整,线粒体和内质网少,结缔组织增生。C3组中雪旺细胞多,胞浆饱满,核膜完整,形态佳,髓鞘完整,厚度适中,线粒体和滑面内质网丰富。结论：通过实验我们得到在大鼠神经移植过程中,冻存异体神经移植在神经移植长度≤20mm内,神经再生能力与白体神经移植相当,相对于神经移植长度>20mm的冻存异体神经移植和异体神经移植,其神经再生能力增强。并为临床骨盆恶性肿瘤中压迫神经所导致的手术禁忌提供新的思路。
【作者】马英华；
【导师】胡大为；宋有鑫；
【作者基本信息】承德医学院，肿瘤学，2011，硕士
【关键词】冻存；异体神经；移植；功能恢复；

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