大鲵年龄鉴定方法研究

【摘要】通过文献查阅的方法,综述了鱼类和两栖类年龄鉴定的方法。2012年6月到2014年3月,陆续从浙江某养殖基地采集大鲵(Andriasdavidianus)261尾,包括1～6龄6个年龄段,测量其体长体重并取骨骼材料。比较选择了大鲵年龄鉴定的骨骼材料,对利用趾骨材料进行年龄鉴定的实验方法作了详细研究,对体长体重法鉴定大鲵年龄作了初步探索,用骨龄学方法结合体长体重数据对大鲵的生长特征作了一定的描述。选择2龄大鲵作为实验材料,分别对大鲵的脊椎骨、耳石、趾骨和跖骨进行初步观察和切片处理。发现耳石细小且脆弱,取材较困难。脊椎骨材料丰富,取材方便,但骨质较坚硬。选用大鲵的趾骨和跖骨共17块骨骼材料进行切片和染色处理,结果显示,共有7块骨节可以作为年龄鉴定的材料,包括所有五趾的第二趾骨和第三、四趾的第三趾骨。其中以第三、四趾的第二趾骨的骨骼横截面直径大、骨髓腔最小、骨化面积最大,可以作为年龄鉴定的理想材料。选择5龄大鲵趾骨作为实验材料,对其进行了去福尔马林、去除肌肉和结缔组织、脱钙、冰冻切片机切片、染色观察的处理。分别对趾骨切片法的各步骤具体的处理方法进行了探究。结果显示,用2%的氢氧化钠进行短暂的煮沸处理是去除骨骼上附着组织的最好方法。2%-6%浓度的硝酸均可以用来进行5龄大鲵趾骨的脱钙,其中以3%和4%效果最好。脱钙不足的切片重新脱钙后,在潮湿状态下可以在短时间内重新显现年轮。染色对比实验显示,染色和不染色两组切片均能有效的显示年轮。染色后主要对骨髓腔的显示更为清晰,对年轮的加强效果一般,可以选择不染色。大鲵趾骨切片显示为疏密、明暗交替的环纹,环片成闭合的同心圆排列。暗而窄的环纹即为年轮,年轮特征明显,可以用于年龄鉴定。没有经历越冬的1龄大鲵不形成年轮,从2龄越冬开始开始,每一年增长一个年轮,表现出一年一轮的增长规律。年轮形成的时间与冬眠时间同步,即1次冬眠1个年轮。6龄之内年轮的直径匀速增长。对1-5龄大鲵体长体重数据进行分析,对大鲵的体长体重和年龄的关系分别进行拟合,并分析体长体重的频率分布。根据相关分析结果对大鲵年龄进行推算,对大鲵年龄实测值与估算值进行比较,判断其对年龄鉴定的准确度。5个年龄组,各年龄组体长范围分别为：1龄体长范围-≤23.33cm,平均体长为18.64cm；2龄体长范围27.47-36.61cm,平均体长为32.18cm;3龄体长范围38.03-47.15cm,平均体长为46.05cm；4龄体长范围为48.68-54.49cm,平均体长为49.43cm；5龄体长58.17-69.88cm,平均体长为63.24cm。不同年龄段体长数据没有交叉。各个年龄组体长增长的级差幅度不大,除了3龄到4龄增长幅度较小外,其他相邻年龄组体长增长均匀。方差分析表明,不同年龄组体长之间具有极显著差异(P<0.01),其中3龄和4龄大鲵体长差异显著,其他相邻年龄组体长差异极显著。体长随年龄增长呈直线上升。二者关系以最小二乘法求出其一元回归方程为y=10.646x+9.97,回归系数b=10.64,相关系数R2=0.9728,为显著相关。利用体长范围对大鲵年龄进行计算,存在数据范围过窄,无法涵盖所有的大鲵样本的问题,可鉴别率63%,准确度79%；利用体长年龄回归方程对大鲵年龄进行计算,可鉴别率100%,准确度71%,存在低估大鲵年龄的问题；利用体长频率分布对大鲵年龄进行鉴定,可鉴别率86%,准确度61%。对5个年龄组的大鲵体重进行分析,各年龄组体重范围为：1龄体重≤55.40g,平均体重为40.47g；2龄体重范围168.37-246.99g,平均体重为199.19g；3龄体重范围437.85-674.02g,平均体重为626.94g;4龄体重范围699.43-931.46g,平均体重为783.36g；5龄体重范围1200.80-2013.56g,平均体重为1691.45g。不同年龄段体重数据没有交叉。随着年龄增长,大鲵体重增加越来越快,并且体重增长的速度也越来越快。方差分析结果显示,不同年龄大鲵体重之间具有显著差异(P<0.05),其中除了3龄和4龄的体重差异不显著外,其他相邻年龄组体重差异均显著。1-5龄大鲵体重的增长随年龄龄增长呈指数函数曲线。以最小二乘法求出其一元回归方程为y=25.94e0.8835x,回归系数b=25.94,相关系数R2=0.8835,为显著相关。利用体重范围对大鲵年龄进行鉴定,可鉴别率74%,准确度63%；利用体重年龄回归方程计算大鲵年龄,可鉴别率100%,准确度60%。综合体长体重年龄鉴定法和硬组织材料年龄鉴定法两种方法,比较可知：趾骨切片法是大鲵年龄鉴定的最精确方法。利用体长体重进行年龄鉴定比较方便快捷,缺点是需要较大的样本量和有效的数据分析方法,否则鉴定结果不准确。大鲵趾骨轮纹的形成周期和冬眠周期可能保持一致,在进行硬组织年龄鉴定时要考虑到具体的饲养条件。
【作者】刘小召；
【导师】肖汉兵；
【作者基本信息】华中农业大学，水产养殖，2014，硕士
【关键词】大鲵；体长；体重；趾骨；冰冻切片；年龄鉴定；

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