CRP诱导人脐静脉内皮细胞凋亡及阿托伐他汀的保护作用

【摘要】目的：以C反应蛋白（C-reactiveprotein,CRP）为诱导剂，诱导人脐静脉内皮细胞(Humanumbilicalveinendothelialcells,HUVECs)凋亡，并探讨阿托伐他汀对其保护作用。方法：将培养的HUVECs与不同浓度的CRP(5μg/mL,10μg/mL,20μg/mL)及阿托伐他汀(0.1μmol/L,1μmol/L，10μmol/L)作用24小时后，吖啶橙/溴化己啶荧光染色观察凋亡细胞形态，流式细胞仪检测细胞早期凋亡率，RT-PCR及Westernblotting分别检测Bcl-2、Bax、P53的基因及蛋白表达。结果：HUVECs在与不同浓度的CRP作用24小时后，随着CRP浓度的增加，HUVECs早期凋亡率逐渐升高。5μg/mLCRP组，10μg/mLCRP组，20μg/mLCRP组凋亡率分别为(2.50±0.44%，8.07±0.7%，12.84±0.77%)，与对照组（0.64±0.06%）相比均有统计学差异(P<0.01)。20mg/LCRP组与10μg/mLCRP组相比，HUVECs凋亡率亦有明显升高(P<0.01)。HUVECs在不同浓度CRP作用24小时后，随着CRP浓度的增加，Bcl-2蛋白表达逐渐减弱，Bax蛋白表达逐渐增强，P53的蛋白表达亦逐渐增强，Bcl-2/Bax的比值逐渐降低，P53/Bax的比值逐渐亦逐渐降低，它们的表达量与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.01)。HUVECs在20μg/mLCRP及不同浓度阿托伐他汀作用24小时后，随着阿托伐他汀浓度的增加，与20μg/mLCRP组相比，阿托伐他汀干预组的HUVECs早期凋亡率逐渐减少。0.1μmol/L阿托伐他汀组，1μmol/L阿托伐他汀组，10μmol/L阿托伐他汀组凋亡率分别为（10.45±0.74%，8.38±0.6%和7.35±0.44%），中、高浓度阿托伐他汀组的HUVECs早期凋亡率较20μg/mLCRP组明显下降，差异具有统计学意义((P<0.01)，高浓度阿托伐他汀组与中浓度阿托伐他汀组相比，差异亦有统计学意义（P<0.01）。随着阿托伐他汀浓度的增加，Bcl-2蛋白表达逐渐增强，Bax的蛋白表达逐渐减弱，P53的蛋白表达亦逐渐减弱，Bcl-2/Bax的比值逐渐降低，P53/Bax的比值逐渐亦逐渐降低，中、高浓度阿托伐他汀组的Bcl-2、Bax、P53蛋白表达量以及Bcl-2/Bax的比值与20μg/mLCRP相比差异有统计学意义(P＜0.01)；高浓度阿托伐他汀组P53/Bax的比值与20μg/mLCRP相比差异有统计学意义(P＜0.01)。结论：CRP可诱导HUVECs凋亡，这种促凋亡作用可能与上调P53、Bax的蛋白表达和抑制Bcl-2的蛋白表达有关。中、高浓度的阿托伐他汀对CRP诱导的细胞凋亡有保护作用，其机制可能与上调Bcl-2蛋白表达，抑制P53、Bax的蛋白表达有关。Bcl-2蛋白对Bax蛋白具有负调节机制。P53蛋白的表达可能与Bax蛋白表达的激活有关，是Bax蛋白表达的调控蛋白。
【作者】何文凤；
【导师】吕湛；
【作者基本信息】川北医学院，内科学，2014，硕士
【关键词】C反应蛋白；人脐静脉内皮细胞；凋亡；阿托伐他汀；

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