赤皮青冈居群遗传多样性与遗传结构分析

【摘要】赤皮青冈(Cyclobalanopsisgilva)属壳斗科青冈属常绿乔木,树干通直,材质坚硬,是优良的珍贵用材树种,具有重要的经济价值和生态效益,现已被列为国家II级保护植物。本文利用ISSR分子标记技术对来自湖南,浙江分布区内的7个居群共140个样本进行遗传多样性和遗传结构分析,研究居群内和居群间的遗传多样性水平,揭示不同地理分布区赤皮青冈居群的遗传关系,为赤皮青冈资源的有效保护、合理利用及遗传改良策略的制定提供理论依据,研究结果及方法如下：1、确立了适合于赤皮青冈的ISSR-PCR反应体系。通过单因素试验对影响赤皮青冈ISSR-PCR反应体系的5个主要因素进行研究,初步确定各个因素的最适浓度范围；再通过正交设计和直观分析对PCR扩增体系进行深度优化,最后得到一套赤皮青冈ISSR-PCR扩增的最佳反应体系：即在20μL反应总体系中模板DNA为20ng,dNTPs浓度为02mmol/L,Mg2+浓度为25mmol/L,引物浓度为02μmol/L,TaqDNA聚合酶为1.0U,并得到赤皮青冈ISSR-PCR反应最佳扩增程序。2、以优化好的反应体系为基础,从100条ISSR引物中筛选出13条多态性引物,对赤皮青冈7个居群共140个DNA样品进行遗传多样性研究。13个引物共检测到140个位点,其中多态位点111个,总的多态位点百分率(P)为79.29%,各居群P值在61.42%～75.00%之间,洞口居群最高,桑植居群最低。赤皮青冈居群总体水平上的Shannon信息指数(I)为0.4514,各居群I值在0.3234～0.4193之间,Nei基因多样性指数(H)总体水平为0.3021,各居群H值在0.2164～0.2871之间,I值和H值都是靖州居群最高,桑植居群最低。以上遗传分析结果表明,赤皮青冈各居群内遗传多样性水平相对较低。3、赤皮青冈居群间的遗传分化较大,基因分化度(Gst)为0.0613,这表明,赤皮青冈的遗传变异大部分存在于居群内,居群内的遗传变异占总变异量的93.87%,居群间的变异为6.13%。基因流(Nm)为3.8283,Nm>1,结果显示,赤皮青冈居群间的基因流水平可以防止遗传漂变的作用,降低局部产生的变异,维系居群间的相似性。4、7个居群遗传距离的聚类结果表明,地理距离较近的居群聚在一起,居群间遗传距离的大小与居群间地理距离的远近有一定的相关性。居群间遗传距离(D)值在0.0260～0.1596之间,其中湖南永定居群和湖南桑植居群的遗传距离最小,湖南靖州和浙江庆元的遗传距离最大,这些结果显示,赤皮青冈居群地理距离的远近是影响居群遗传变异的主要因素。5、对现有赤皮青冈7个居群的ISSR遗传多样性和遗传结构的分析结果表明,赤皮青冈资源匮乏的主要原因不是来自遗传变异,而是来自人为的干扰和生境的破坏,据此,对赤皮青冈现存居群的保护提出了相应的策略：提高林农护林意识、建立保护区、对该物种展开深入研究、建立种质资源库。
【作者】朱品红；
【导师】李志辉；
【作者基本信息】中南林业科技大学，森林培育，2014，硕士
【关键词】赤皮青冈；ISSR；分子标记；遗传结构；遗传多样性；

【参考文献】
[1]王清卿.加味半夏白术天麻汤对痰浊中阻型高血压病患者血尿酸及血脂的影响[D].黑龙江中医药大学,中医内科学（专业学位）,2014,硕士.
[2]赵丹丹.去氢厄弗酚在小鼠体内的药代动力学和体内过程研究[D].北京中医药大学,药物分析学,2013,硕士.
[3]赵琥.基于公共治理理论构建“三维”食品安全监管机制[D].西北大学,公共管理（专业学位）,2012,硕士.
[4]胡彦莹.安徽省生态农牧业发展因素分析及对策研究[D].合肥工业大学,企业管理,2013,硕士.
[5]王福胜,宋海旭.终极控制人、多元化战略与现金持有水平[J].管理世界,2012,07:124-136+169.
[6]刘云.基于蚁群聚类的特征基因选择算法研究[D].湖南大学,计算机科学与技术,2010,硕士.
[7]陈秀.MEMS薄膜纳米压痕法测试和仿真研究[D].北京理工大学,电子与通信工程,2014,硕士.
[8]张梦慧.股权激励机制下的高管自利行为研究[D].浙江工商大学,金融学,2014,硕士.
[9]刘超.氮掺杂多孔碳材料的合成及其应用研究[D].天津大学,2014.
[10]吴志华.基于知识发现的时序数据挖掘算法研究[D].华北工学院,2002.
[11].2013年授权的农药专利(杀菌剂篇)[J].今日农药,2014,04:47-48.
[12]马浩剑.泰州市党政代表团来常考察交流[N].常州日报,2015-06-17A01.
[13]单志.多功能纳米磁性粒子的合成及其在细胞富集和质粒DNA纯化中的应用研究[D].四川农业大学,2010.
[14]乔会敏.MEMS惯性器件参数辨识及误差补偿技术研究[D].沈阳理工大学,机械设计及理论,2013,硕士.
[15]黄彦珽.清代宁夏诗歌研究[D].宁夏大学,中国古代文学,2014,硕士.
[16]梁莉春.北美中国留学生学习压力及应对策略的研究[D].兰州大学,教育学,2013,硕士.
[17]崔庆生,乔玉林,赵海朝,臧艳.石墨烯在水中的分散稳定性及其减摩性能研究[J].润滑与密封,2014,05:47-50+120.
[18]杨琳.浊点萃取-火焰原子吸收光谱法分析环境样品中不同形态的Cr、Mn、Co和Cu[D].郑州大学,分析化学,2013,硕士.
[19]查建中.面向经济全球化的工程教育改革战略——产学合作与国际化[J].高等工程教育研究,2008,01:21-28.
[20]阎鸿久,刘利清,王红心.大孔爆破无外露雷管脚线起爆系统的应用和发展[J].有色金属(矿山部分).1992(03)
[21]蔡雄伟.血卟啉单甲醚—光动力疗法诱导HeLa细胞凋亡机制的初探[D].华南师范大学,生理学,2004,硕士.
[22]张卫波.企业所得税纳税筹划问题研究[D].首都经济贸易大学,会计学,2013,硕士.
[23]于真.我国家族企业成功传承的核心影响因素研究[D].浙江工业大学,2009.
[24]李优.《文心雕龙》文体论中的“通变”理论研究[D].湖北师范学院,文艺学,2013,硕士.
[25]赵新欣.危险化学品运输管理平台的设计与其中若干问题的研究[D].华东师范大学,计算机应用技术,2013,硕士.
[26]付玉.高速WLAN的同步技术研究[D].西南交通大学,通信与信息系统,2014,硕士.
[27]郑红霞.货车车轮辐板孔裂纹形成原因及疲劳扩展特性研究[D].北京交通大学,2007.
[28]杨勤凯.LTE下行资源调度优化算法研究[D].哈尔滨工业大学,电子与通信工程,2013,硕士.
[29]谢深情.论领土被海水完全淹没之后的国家资格[D].吉林大学,法律,2014,硕士.
[30]李玲.埃莉诺·奥斯特罗姆的公共资源治理理论及其应用[D].云南财经大学,公共管理,2013,硕士.
[31]张萌.碳关税征收对广东省出口贸易的影响[D].广东外语外贸大学,国际贸易学,2013,硕士.
[32]肖庆华.岩石力学与工程中的数据挖掘技术应用[D].河海大学,2004.
[33]田腾正.经尿道前列腺钬激光剜除术与经尿道前列腺电切术临床对比研究[D].吉林大学,临床医学,2013,硕士.
[34]刘忍肖,张丽娜,李学毅,齐笑迎,吴侠,汤艳,魏文博,葛广路.半导体量子点光谱特性标准样品及高分辨透射电子显微镜粒径定值研究[J].中国科学:物理学力学天文学,2011,09:1023-1028.
[35]晨乐木格,刘茂松,黄峥,陈斌,张明娟,徐驰.我国西北地区芨芨草-苦豆子群落根系分布与种间关系[J].植物生态学报,2009,04:748-754.
[36]佟强,周园春,阎保平.关联规则挖掘算法[J].微电子学与计算机,2005,06:68-72.
[37]杨博元.简论功能对等理论视角下企业外宣资料英译[D].湖南师范大学,翻译（专业学位）,2013,硕士.
[38]张跃宇,吴宇红.基于数据挖掘的WLAN告警分析[J].电子科技,2004,12:15-17+32.
[39]苏晓慧.被动锁模光纤激光器的理论模拟和特性分析[D].哈尔滨工业大学,2013.
[40]于淼.基于网络经济的第三方支付企业的竞争优势分析[D].北京交通大学,2013.
[41]刘芳.关于高中英语教师教学语言石化现象的实证性研究[D].河北师范大学,教育,2013,硕士.
[42]陈凯.多角度看电信普遍服务[J].通信世界.2001(16)
[43]卢青青.和平发展与和谐世界外交战略理念研究[D].南京师范大学,科学社会主义与国际共产主义运动,2012,硕士.
[44]郑强,张海光,韩澎,程京.GAP综合信息管理系统在中药产业规范化中的应用[A].中国中医药研究促进会.中国中医药研究促进会专业委员会成立大会暨“全国中药关键技术研讨会”资料汇编[C].中国中医药研究促进会:,2003:11.
[45]仪赫莫仁.营养神经治疗在感染性下肢淋巴水肿综合治疗中的作用[D].吉林大学,临床医学（专业学位）,2013,硕士.
[46]杨炳儒,唐菁.基于复杂类型数据的发现特征子空间模型(DFSSM)的研究[J].中国工程科学,2003,01:56-61+68.
[47]于艳艳.新中等职业英语教学大纲下外研社版中职英语教材（基础模块）评估[D].长安大学,外国语言学及应用语言学,2014,硕士.
[48]严梁恒.9种鸭科鸟类的线粒体基因组序列分析与雁形目系统发生研究[D].安徽大学,生态学,2014,硕士.
[49]胡洋.实验课教学信息管理系统的设计与实现[D].吉林大学,软件工程,2014,硕士.
[50]高标.输电线路采用全绝缘复合杆塔的可行性设计研究[D].重庆大学,电气工程,2014,硕士.