PP2对渥曼青霉素诱导的小鼠空间记忆损伤的保护作用及机制研究

【摘要】糖原合酶激酶3(Glycogensynthasekinase-3,简称GSK-3)广泛存在于真核生物细胞中,属于糖原合酶激酶家族,是一种多功能Ser/Thr蛋白激酶。GSK-3包括两种亚型,GSK-3α和GSK-3β,其中GSK-3β在体内广泛表达,并且参与机体内多个信号转导途径。研究表明,活化的GSK-3β能降低cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的表达并抑制其转录活性,但其机制尚不明确。本实验中,我们以小鼠为研究对象,系统研究了PP2在GSK-3p活性改变对CREB的影响及可能机制中的作用。选择8周龄的雄性昆明小鼠40只,随机分为四组,分别是对照组、wort组、PP2组、wort+PP2组。每组小鼠经过六天的定位航行实验,第七天手术侧脑室给药,24小时后检测药物对记忆能力的影响,然后取海马用免疫印迹的方法检测相关蛋白的表达。结果表明：(1)水迷宫结果显示：经过6天的定位航行实验,小鼠能在极短的时间内找到隐藏平台,具有相对稳定的记忆,且各组小鼠间无显著差异。注药24小时后检测小鼠找到隐藏平台的潜伏期变化,结果发现：与对照组相比,wort组小鼠找到隐藏平台的潜伏期明显变长；在此基础上注射PP2后,小鼠找到隐藏平台的潜伏期变短。空间探索实验结果显示：穿过隐藏平台所在象限的次数减少(p<0.001)以及在隐藏平台所在象限的时间减少(p<0.01)；相比于wort组,穿过隐藏平台所在象限的次数增多(p<0.01)以及在隐藏平台所在象限的时间也增加(p<0.01)。(2)免疫印迹结果显示：相比于对照组,wort组GSK-3β的总体水平无明显影响,但GSK-3β的Ser9位点的磷酸化程度显著性降低(p<0.05),PP2组的磷酸化水平没有明显改变；相比于wort组,wort+PP2组GSK-3β的Ser9位点的磷酸化水平也未发生明显改变。(3)wort组Fyn磷酸化水平明显高于对照组(p<0.01),单独给予PP2却显著性降低Fyn磷酸化水平(p<0.01);相比于wort组,wort+PP2组的Fyn磷酸化程度显著性降低(p<0.01)。(4)与对照组相比,wort组NR2B的Tyr1472位点磷酸化水平显著性增强(p<0.01),与wort组相比,wort+PP2组NR2B的Tyr1472位点磷酸化水平显著性降低(p<0.001)；各组间NR2B总量未发生明显改变。(5)相比于对照组,wort组CaMKII的Thr286位点磷酸化水平有显著性增强(p<0.01)；与wort组相比,wort+PP2组CaMKII的Thr286位点磷酸化程度降低(p<0.05)；各组间总的CaMKII水平未发生明显变化。(6)相比于对照组,wort组CREB的Ser133位点磷酸化程度降低(p<0.01)；相比于wort组,wort+PP2组CREB的Ser133位点磷酸化水平增加(p<0.05),但各组间CREB的总体水平变化不明显。结论：wortmannin作为GSK-3β的激活剂,使GSK-3β过量表达,而GSK-3β可作为Fyn的上游激酶,影响Fyn的表达,而Fyn又能作用于NMDAR的重要调节亚基NR2B,使其磷酸化程度发生改变,离子通道开放,Ca2+内流,与CaM结合形成复合物作用于CaMKII,使其活性发生改变,调控CREB的活性,最终对学习记忆造成影响。而PP2(Fyn的非特异性抑制剂)抑制Fyn的活性,从而逆转下游一系列的反应,最终对wort引起的学习记忆的损伤起到保护作用。本研究提出了一个新的信号途径即PP2可能参与GSK-3β对CREB活性的调节机制。本实验对于多种神经系统疾病(例如AD、PD)的治疗提供了一定的理论依据。
【作者】逯志敏；
【导师】王少辉；
【作者基本信息】华中师范大学，动物学，2014，硕士
【关键词】糖原合成激酶-3β；cAMP反应元件结合蛋白；wort；PP2；空间学习记忆能力；

【参考文献】
[1]夏大永,罗景青,龚亮亮.情报处理中数据挖掘的应用[J].舰船电子工程,2004,06:22-25.
[2]马婷婷.FDI对中国外贸可持续发展能力影响的研究[D].山东财经大学,国际贸易学,2013,硕士.
[3]戴小平.四维地震在AAA油田油藏描述及剩余油分布预测中的应用[D].中国地质大学,油气田开发工程,2014,博士.
[4]刘畅.陕西秦岭山地体育产业布局研究[D].西安体育学院,体育人文社会学,2013,硕士.
[5]叶亚军.农村中小学教师流失问题研究[D].湖南师范大学,课程与教学论,2013,硕士.
[6]仲小敏.除磷微生物筛选及除磷条件优化研究[D].江南大学,环境工程,2012,硕士.
[7]罗志勇.一点多线模式下的集装箱甩挂运输调度优化[D].大连海事大学,物流工程,2014,硕士.
[8]韦朝阳,陈同斌.高砷区植物的生态与化学特征[J].植物生态学报,2002,06:695-700.
[9]李成.纳米梁及纳米类梁结构的静力学和动力学的非局部理论、模型及求解[D].中国科学技术大学,2011.
[10]钟富坤.高等教育自学考试制度改革与发展研究[D].福建师范大学,教育学原理,2004,硕士.
[11]宋安宁.企业所得税优惠的法律分析[D].吉林财经大学,经济法学,2014,硕士.
[12]王春苗.初盛唐文人干谒与诗文研究[D].青岛大学,中国古代文学,2013,硕士.
[13]王宇.基于网络文本的地名空间模糊建模[D].南京师范大学,地图学与地理信息系统,2012,硕士.
[14]付萌萌.省级网络电视台内容建设策略研究[D].河北大学,新闻与传播,2014,硕士.
[15]王博.杯吡咯衍生物的合成及金属配合物的研究[D].扬州大学,有机化学,2012,硕士.
[16]张静.金属性和半导体性单壁碳纳米管的分离技术研究[D].江南大学,2011.
[17]徐宇杰.大容量节能铝电解槽多物理场耦合建模及结构优化研究[D].中南大学,冶金工程,2014,博士.
[18]刘立英.不同行业智力资本信息披露与股价相关性研究[D].黑龙江大学,会计学,2013,硕士.
[19]刘绍生.耐力游泳运动对高脂膳食诱导大鼠NASH形成过程中肝细胞凋亡的影响[D].河北师范大学,运动人体科学,2012,硕士.
[20]高凯,徐海平,孙思伟.通用工程数据处理系统在给排水管网设计中的实现[J].冶金自动化,2001,02:64-65.
[21]邱丽艳.B企业生产物流系统优化与设计[D].华东交通大学,管理科学与工程,2013,硕士.
[22]编辑部.工信部拟制定石墨烯专项行动计划[J].粉末冶金工业,2015,02:73.
[23]陈杰.双向反射分布函数壁面参与的辐射传递问题研究[D].华中科技大学,热能工程,2012,硕士.
[24]杨明举.旅游资源结构和客源结构的时空差异分析[D].西北师范大学,旅游管理,2013,硕士.
[25]孙锡龙.等离激元增强拉曼光谱预处理和识别算法的研究[D].厦门大学,计算机技术,2014,硕士.
[26]陈君霞.输卵管妊娠患者输卵管壶腹部神经纤维密度改变及其临床意义[D].浙江大学,妇产科学,2013,硕士.
[27]张艳.基于Web Service的电子政务数据交换平台的实现[D].中国海洋大学,计算机应用技术,2003,硕士.
[28]陈慧芝.雷丸化学成分及药理作用的研究[D].吉林农业大学,中药学,2012,硕士.
[29]郭更臣.武汉市人力资本与经济增长的协整分析[D].华中科技大学,西方经济学,2012,硕士.
[30]王珅.富血小板血浆对兔半月板无血管区损伤修复的作用[D].河北医科大学,外科学,2013,硕士.
[31]曹琳.金圣叹《才子古文》的评点研究[D].宁夏大学,中国古代文学,2014,硕士.
[32]李晋.谢国桢史学研究[D].扬州大学,史学理论及史学史,2011,硕士.
[33]韩娜.基于多金属氧酸盐和多齿N/O配体的无机-有机杂化物的组装及性能研究[D].渤海大学,无机化学,2014,硕士.
[34]彭佩.有毒有害气体公路隧道射流巷道式施工通风技术研究[D].西南交通大学,市政工程,2014,硕士.
[35]徐克周.商业银行虚拟化资源池的设计与实现[D].厦门大学,软件工程,2014,硕士.
[36]张慧敏.电对燃料电池用于铬铜镍重金属对苯酚尿素的产电及脱除基础研究[D].浙江大学,环境工程,2014,博士.
[37]刘子寒.长波红外成像光谱仪的设计与研究[D].苏州大学,光学工程,2013,硕士.
[38]张洪涛.基于XK6336数控摇臂铣床的回抽式搅拌摩擦焊机改造设计[D].南昌航空大学,航空工程,2013,硕士.
[39]孔令雅.复合接种土壤生物对红壤性状及花生生长的影响[D].南京农业大学,土壤学,2012,硕士.
[40]卫莉.留学生与中国近代建筑学的体制化[D].山西大学,科学技术哲学,2004,硕士.
[41]孙润雪.化浊解毒方中药血清对肝星状细胞ERK及PI3K/Akt信号通路的影响[D].河北医科大学,中西医结合临床（专业学位）,2013,硕士.
[42]卢雅倩.优势视角模式下对受暴妇女的社会工作介入研究[D].华中科技大学,社会工作,2013,硕士.
[43]周媛.形象思维训练对小学生景物描写的促进作用[D].辽宁师范大学,心理健康教育（专业学位）,2012,硕士.
[44]胡文星.大麻素Ⅱ型受体激动剂促进小鼠心肌梗死后的内源性心肌再生[D].第四军医大学,内科学（专业学位）,2014,硕士.
[45]于妍妍.微渗析活体取样—电化学在线分析系统对生命信息分子实时检测的研究与应用[D].华东师范大学,2012.
[46]高山.运城盐池神庙建筑研究[D].西安建筑科技大学,建筑历史与理论,2004,硕士.
[47]李向果.西兰花叶中硫代葡萄糖苷和原花青素的生物学效价评定[D].甘肃农业大学,动物营养与饲料科学,2013,硕士.
[48]许洁.景区景点发展中的潜在危机及其预防规避机制[D].东北财经大学,旅游管理,2003,硕士.
[49]付腾达.基于GPU并行聚类的加密分组密码算法的研究及实现[D].南京理工大学,计算机应用技术,2013,硕士.
[50]杨独.悬臂浇筑连续刚构桥施工控制和风险评估[D].北京交通大学,2010.