Cyp19a1a基因在不同倍性鲫鲤中的研究

【摘要】P450芳香化酶是一种内置网状酶,也叫作芳香化酶或雌性激素合成酶,它的主要作用是将雄激素转化为雌激素,是该过程的关键的限速酶。在硬骨鱼类中,P450芳香化酶是由两种不同的基因编码形成的,它们是性腺型芳香化酶CYP19A(cypl9ala)和脑型芳香化酶CYP19B(cypl9a1b)。前者主要在卵巢中表达,参与雌激素生物合成以及卵巢分化,在性腺分化中起主要作用,后者主要在脑中表达。研究表明,雌激素在性别分化,卵巢滤泡发育以及维持雌性性征上起重要作用,特别是雌激素中的雌二醇作为性类固醇参与许多关键的过程,包括生长、发育和繁殖等。因此,cypl9ala基因的适量表达成为大多数脊椎动物性腺发育和繁殖的关键。世界上首次培育成功两性可育、遗传性状稳定的异源四倍体鲫鲤群体在生物进化和鱼类遗传育种方面具有重要意义。通过异源四倍体鲫鲤与二倍体红鲫进行倍间交配,研制了生长速度快、抗病性强、性腺败育等多种养殖优势的三倍体湘云鲫。异源四倍体鲫鲤、三倍体湘云鲫的形成为不同倍性鱼的生物学比较提供了重要的生物学平台,对生殖和发育的系统研究具有重要意义。本论文比较分析了二倍体红鲫、三倍体湘云鲫和四倍体鲫鲤cypl9ala基因在分子水平和蛋白水平的表达差异。主要内容如下：1.开展了二倍体红鲫、三倍体湘云鲫和四倍体鲫鲤cypl9ala基因的cDNA全长序列克隆及组织表达分析：采用同源克隆和cDNA末端快速扩增技术(RACE),克隆获得二倍体红鲫、三倍体湘云鲫和四倍体鲫鲤cypl9a1a基因全长序列,其中红鲫cypl9ala基因全长1954bp,编码含有517个氨基酸的蛋白；三倍体鱼cyp19a1a基因全长1960bp,编码含有517氨基酸的蛋白；四倍体鱼cypl9ala基因全长1782bp,编码含有517氨基酸的蛋白。RT-PCR表明,在三倍体湘云鲫中,cypl9ala基因在卵巢中的表达量最高；其次是脑,精巢；在脾脏中也有少量表达,在其他组织没有明显表达。2.开展了二倍体红鲫、三倍体湘云鲫和四倍体鲫鲤卵巢cypl9ala基因mRNA:表达差异研究。实时荧光定量PCR结果显示：繁殖期时,不同倍性鲫鲤卵巢中,cypl9ala基因在三倍体鱼中表达最低,在非繁殖期时,在不同倍性鲫鲤卵巢中,cypl9ala基因在三倍体鱼中表达最高。由于cypl9ala的主要作用是将雄激素转化为雌激素,该基因在繁殖季节时三倍体湘云鲫中的异常表达可能与其不育有关。3.开展了二倍体红鲫、三倍体湘云鲫和四倍体鲫鲤CYP19A蛋白表达差异分析。Western-blot结果表明：无论繁殖季节还是非繁殖季节中,CYP19A表达在三倍体湘云鲫的卵巢中均为最低。表明三倍体湘云鲫的雌鱼中雌激素表达不足,证实了其不育的特性。
【作者】张卓慧；
【导师】刘少军；
【作者基本信息】湖南师范大学，发育生物学，2014，硕士
【关键词】异源四倍体；三倍体湘云鲫；P450芳香化酶；不育；

【参考文献】
[1]伍迪.二乙烯基苯与含硅烷基交替共聚物的合成及其光物理性质的研究[D].杭州师范大学,应用化学,2013,硕士.
[2]刘莉娜.基于虚拟现实的铁路机车乘务员培训系统的设计与实现[D].西安电子科技大学,教育技术学,2011,硕士.
[3]汪党献,王浩,马静.中国区域发展的水资源支撑能力[J].水利规划设计.2001(04)
[4]李建会.有机磷农药氧乐果诱导机体糖尿病前效应的研究及机制探讨[D].吉林大学,卫生毒理学,2013,硕士.
[5]吴欢.增强大学生社会主义核心价值观培育实效性研究[D].西南大学,思想政治教育,2014,硕士.
[6]刘成,冯元琨,李春文,杜继宏.基于非线性系统受控因子的能控性分析方法[J].控制与决策,1997,S1:504-507.
[7]钟扬.中国原创奢侈品品牌创建策略研究[D].武汉纺织大学,艺术设计,2014,硕士.
[8]马蓉.先秦时期山西武术发生发展状况的研究[D].中北大学,民族传统体育学,2013,硕士.
[9]任宇强.FB45机场运输车转向系统研究[D].长安大学,机械工程（专业学位）,2013,硕士.
[10]阎君.食品冷链物流市场化研究[D].北京交通大学,2007.
[11]王哲,杨林,杨群.论客户智能在企业中的应用[J].物流技术,2004,09:35-37.
[12]姚富光.智能高速在线异物识别分拣关键技术研究[D].重庆大学,2009.
[13]严乐.钢丝网外喷高强砂浆加固砼柱的试验研究及数值仿真分析[D].西安理工大学,结构工程,2004,硕士.
[14]顾巧玲.B2C环境下网站临场感与消费信任及购买意愿的关系研究[D].苏州大学,企业管理,2014,硕士.
[15]张灿.室内遥控LED照明系统的设计与实现[D].杭州电子科技大学,电路与系统,2013,硕士.
[16]刘新,张纪梅,代昭.基于石墨烯-金纳米粒子复合材料的DNA生物传感器[J].吉林大学学报(理学版),2013,06:1164-1168.
[17]赵天琳.动量策略在我国外汇市场中应用的研究[D].北京交通大学,2014.
[18]牛萌.混合动力车用电池均衡方案研究[D].北京交通大学,2010.
[19]贺广兴.城市热岛与空气污染物特性分析及其影响参数研究[D].中南大学,土木工程,2014,博士.
[20]赵秋园.古典文明的殉道者[D].东北师范大学,世界史,2012,硕士.
[21]吴立霞.聚氨酯-丙烯酸酯/纳米SiO_2复合乳液的合成及性能表征[D].安徽大学,高分子化学与物理,2014,硕士.
[22]王志超.非合作航天器视觉位姿测量方法的研究[D].哈尔滨工业大学,机械电子工程,2013,硕士.
[23]肖嫚.经皮骨折间隙入路撬拨复位加空心螺钉内固定治疗跟骨骨折的临床观察[D].湖北中医药大学,中医骨伤科学（专业学位）,2013,硕士.
[24]司马则茜.带利率的风险模型的破产问题[D].曲阜师范大学,概率论与数理统计,2004,硕士.
[25]刘毛.低损耗材料复介电常数的自动化术测试技术研究[D].苏州大学,通信与信息系统,2013,硕士.
[26]来燕芳.陶瓷纤维、玄武岩纤维、聚苯硫醚纤维及聚醚醚酮纤维的分析鉴别方法的研究[D].东华大学,纺织工程（专业学位）,2014,硕士.
[27]王佳裕,戴启洲,鱼杰,颜亦舟,陈建孟.活性炭催化臭氧氧化扑热息痛的机制研究[J].环境科学,2013,04:1402-1410.
[28]王明霞.邻苯二甲酸二辛酯和氯仿联合染毒对小鼠脑组织的影响[D].吉林大学,劳动卫生与环境卫生学,2013,硕士.
[29]孟宪恕.商禽诗歌美学研究[D].苏州大学,中国现当代文学,2014,硕士.
[30]许恒周,殷红春,石淑芹.代际差异视角下农民工乡城迁移与宅基地退出影响因素分析——基于推拉理论的实证研究[J].中国人口.资源与环境,2013,08:75-80.
[31]李小渝.论企业人力资本投资与风险防范[D].四川大学,企业管理,2003,硕士.
[32]李克向.我国定向井丛式井技术取得重大进展[J].天然气工业.1990(03)
[33]徐喜媛.内皮祖细胞移植在脓毒症大鼠中的作用研究[D].内蒙古大学,生物工程,2014,硕士.
[34]张堃.中学语文现代文学作品文体教学研究[D].扬州大学,学科教学,2012,硕士.
[35]徐伟锋.中国南车融资策略研究[D].西南交通大学,工商管理（专业学位）,2013,硕士.
[36]于吉鹏.板式家具倒刺固定连接件连接强度研究[D].中南林业科技大学,家具与室内设计工程,2013,硕士.
[37]田锐花.多聚磷酸盐对牛肉加工特性的影响研究[D].南京农业大学,食品工程,2012,硕士.
[38]卢可.27例男性乳腺癌临床病理特征和生存分析[D].山东大学,外科学（专业学位）,2013,硕士.
[39]杨敏.顺应论视角下的称谓语动态选择及功能研究[D].贵州师范大学,课程与教学论,2014,硕士.
[40]张美华.羟基磷灰石的制备及其对有机物吸附行为的研究[D].济南大学,环境科学,2012,硕士.
[41]张轶.中国家电企业的品牌国际化问题研究[D].山东大学,国际商务（专业学位）,2013,硕士.
[42]李永鹏.高强高韧性桥面铺装混凝土制备及其性能研究[D].长安大学,道路材料科学与工程,2014,硕士.
[43]李晓峰.天马—曲村晋侯墓地出土青铜器铭文集释[D].吉林大学,历史文献学,2004,硕士.
[44]郭庆学.两种小径竹对林下幼苗更新及幼树生长的影响[D].西南大学,生态学,2013,硕士.
[45]徐建源,张彬,林莘,李斌,腾云.能谱熵向量法及粒子群优化的RBF神经网络在高压断路器机械故障诊断中的应用[J].高电压技术,2012,06:1299-1306.
[46]范欣.基于义务视角探析我国住房权立体保障体系[D].山东大学,民商法学,2013,硕士.
[47]李力,李志平,王亮,吕航,文继锋,陈松林.稳定控制装置中策略搜索匹配状态机模型[J].电力系统自动化,2012,17:86-89.
[48]王玲,刘胜,李建刚,赵君煜.基于PC的HT-6M托卡马克控制系统的设计与实现[J].微计算机信息.2004(11)
[49]郑勤奋,吴健康,王文涛.树型分类器的研究[J].自动化学报,1987,02:94-100.
[50]孙翀.北京山地地区主要森林类型碳汇潜力的研究[D].北京林业大学,森林经理学,2013,硕士.