高效液相色谱及电化学技术检测几种药物生物小分子

【摘要】高效液相色谱-电化学检测(HPLC-ECD)联用技术由于其灵敏度高、选择性好、响应快、造价低等优点,已广泛用于医药、生物、化学和环境等领域。由于电化学检测器只对电活性物质有响应,因此有选择性。石墨烯是一种较新的碳纳米材料,由于其优良的电化学性能,现已广泛用于电化学和生物传感领域。本学位论文在简要综述HPLC-ECD在药物分析领域和石墨烯复合物在生物传感领域的应用的基础上,自制了一种喷壁/薄层电化学检测池和几种石墨烯复合物,并用于药物/生物小分析的检测。主要研究工作如下：1.在自制的喷壁/薄层电化学检测器(ECD)上,采用梯度洗脱高效液相色谱(HPLC)同时检测了异烟肼(INH)和利福平(RIF)。选用Shim-PackVP-ODS(150mm×4.6mm)色谱柱,流速1.0mLmin-1,柱温40℃,进样量20μL,紫外检测波长为268nm,安培检测电位为0.9VvsSCE。在选定的色谱条件下,INH和RIF都在0.01-100μM范围内成良好的线性关系(r2=0.999),最低检测浓度分别为0.3nM和0.5nM(S/N=3),比相同条件下的紫外检测器和商品电化学检测器更好。这种喷壁/薄层ECD中的工作电极可以捕获更多的电活性物质,从而改善安培响应,使电极表面的清洗和更新更简便。方法灵敏度高、简捷快速、重现性好,可用于异烟肼和利福平的复方药测定和尿液检测。2.通过循环伏安法在玻碳电极上电沉积氧化石墨烯制得了ERGO/GCE,再通过金铜电化学共沉积/溶铜法(CS)法制得了多孔金纳米粒子/电还原氧化石墨烯复合物修饰电极(AuCS/ERGO/GCE),再将该修饰电极用于喷壁/薄层电化学检测池中,与高效液相色谱结合用于同时检测异烟肼和利福平。这里的镀金可加固氧化石墨烯电还原物在电极上的修饰。在选定的色谱条件下,INH和RIF都在0.01-601μM浓度范围内成良好的线性关系(r2=0.99),最低检测浓度分别为0.2nM和0.6nM(S/N=3)。在该修饰电极上,异烟肼的过电位显著降低,异烟肼和利福平的氧化峰电流增大。该修饰电极在喷壁/薄层电化学检测池中表现出良好的重现性和稳定性,实现了同时检测复方制剂中异烟肼和利福平。3.采用电还原羧基化石墨烯(ERCG)与电聚合磺基水杨酸(PSA)共同修饰玻碳电极,制备了同时分析异烟肼(INH)和尿酸(UA)的电化学传感器。通过QCM技术研究了电极的制备过程,采用扫描电子显微镜和交流阻抗法对ERCG/PSA复合膜的形态学和界面性能进行了表征。通过循环伏安法(CV)和微分脉冲伏安法(DPV)考察了INH和UA在修饰电极上的催化氧化行为。在NH3-NH4CI缓冲液(pH9.0)中,与裸玻碳和PSA修饰电极相比,ERCG/PSA修饰电极显著增大了异烟肼和尿酸的电氧化信号。在优化实验条件下,INH和UA分别在0.05μM～15μM、0.02μM～15μM范围内其DPV-氧化电流与浓度呈线性关系,检测限都为12nM此外,ERCG/PSA修饰电极制备过程简便、在检测INH和UA时体现出好的重现性和高的灵敏度,并且能用于同时分析尿样中的INH和UA。
【作者】鄢红玲；
【导师】谢青季；
【作者基本信息】湖南师范大学，药物分析学，2014，硕士
【关键词】高效液相色谱；喷壁/薄层电化学检测器；石墨烯复合物；异烟肼；利福平；尿酸；

【参考文献】
[1]张少燕.鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤的免疫表型及EBV分型的研究[D].青岛大学,病原微生物,2013,硕士.
[2]李凤坤.住宅区智能化管理系统数据库平台的建设[J].中国住宅设施.2003(09)
[3]刘静.网络语言变异现象初探[D].广西大学,汉语言文字学,2004,硕士.
[4]祝莹莹.pH影响申克氏孢子丝菌菌丝相向酵母相转化实验研究[D].吉林大学,临床医学,2014,硕士.
[5]龚骏超.保障性住房供给需求的分析与预测[D].南京农业大学,土地资源管理,2013,硕士.
[6]张润婕.开发区工业园危险化学品应急管理能力调研分析[D].首都经济贸易大学,安全与环境工程（专业学位）,2014,硕士.
[7]杨胜娟.望都县职教中心职高生自信心现状调查研究[D].河北大学,教育管理,2013,硕士.
[8]胡钢伟,赵克,李凯,米建伟.基于冲突处理的并行工程研究[J].计算机工程与科学,2004,05:103-105.
[9]金亦青.数字控制金卤灯用电子镇流器研究[D].浙江大学,电力电子与电力传动,2004,硕士.
[10]刘建华,张施露,于美,安军伟,李松梅.石墨烯接枝聚吡咯复合物的原位合成及其电容特性研究[J].无机材料学报,2013,04:403-408.
[11]刘彦辉.A汽车4S店服务营销策略研究[D].吉林大学,工商管理,2014,硕士.
[12]刘盼盼.α-内收蛋白基因与原发性高血压的关联研究[D].宁波大学,流行病与卫生统计学,2014,硕士.
[13]王刚.江泽民党建思想对马克思主义中国化的贡献[D].吉林财经大学,马克思主义基本原理,2013,硕士.
[14]唐守强.我国房地产业洗钱方式及风险评估[D].西南交通大学,企业管理,2014,硕士.
[15]王宁昌.电子商务中的安全技术研究[D].扬州大学,信号与信息处理,2011,硕士.
[16]杨爽.ESA教学模式在大学预科班英语教学中的应用[D].渤海大学,课程与教学论,2014,硕士.
[17]李芳元.学生学业成就与家庭资本关系研究[D].湖北大学,课程与教学论,2011,硕士.
[18]张丽静.后殖民语境下《水浒传》英译文化词语转换研究[D].天津财经大学,英语语言文学,2012,硕士.
[19]钟涛.福建古村落的开发与保护[D].厦门大学,人类学,2014,硕士.
[20]徐文庆.我国金融发展水平的空间效应研究[D].西南大学,金融学,2014,硕士.
[21]孙岳.现代汉语语气副词“诚然”的多角度分析[D].吉林大学,汉语言文字学,2014,硕士.
[22]王倩倩.酌定不起诉研究[D].青岛大学,诉讼法学,2013,硕士.
[23]王磊.高架桥环境下高铁无线通信信道建模与仿真[D].西南交通大学,通信与信息系统,2014,硕士.
[24]杨善升,陆文聪,陈念贻.DMOS优化软件及其在化工过程优化中的应用[J].化工自动化及仪表,2005,04:36-39.
[25]王婷婷.有机半导体载流子迁移率的密度泛函研究[D].大连理工大学,物理化学,2013,硕士.
[26]雷双江.烟流排管架单轴直线运动机构及其控制系统设计[D].西南交通大学,机械电子工程,2013,硕士.
[27]郭子渝.基于Stateflow仿真的城市轨道交通站前折返能力计算方法[J].长安大学学报(自然科学版),2015,S1:265-268+278.
[28]王东流.天津塘沽区的犯罪研究[D].天津大学,公共管理,2004,硕士.
[29]段辉娜.信息技术在农业产业化经营中应用的对策研究[D].河北农业大学,2004.
[30]陆关祥.造山带复杂结构构造区遥感——构造综合解析[D].西北大学,2002.
[31]王烨.社会资本、吸收能力与创新绩效的关系研究[D].安徽大学,企业管理,2013,硕士.
[32]计国君.实现知识管理的价值——图书馆评价的终点[J].高校图书馆工作,2005,02:19-23.
[33]董仁才,李思远,全元,董志南,李春明,郑拴宁,刘昱聪.城市可持续规划中的生态敏感区避让分析——以丽江市为例[J].生态学报,2015,07:.
[34]刘晓龙.创业投资基金对文化创意产业投资的风险识别与控制[D].首都经济贸易大学,工商管理（专业学位）,2014,硕士.
[35]高健凯.中国银行操作风险管理控制研究[D].山东大学,工商管理（专业学位）,2013,硕士.
[36]高自友,吴建军,毛保华,黄海军.交通运输网络复杂性及其相关问题的研究[J].交通运输系统工程与信息,2005,02:79-84.
[37]任振中.中国股票市场与外汇市场的动态关联性研究[D].吉林财经大学,数量经济学,2014,硕士.
[38]徐嘉路.双脉冲交变电磁搅拌埋弧堆焊设备研制及应用[D].沈阳工业大学,材料加工工程,2013,硕士.
[39]程荣.风力发电机隔振技术研究[D].江苏科技大学,轮机工程,2014,硕士.
[40]李元博.中国农业银行宁夏分行法律风险管理研究[D].宁夏大学,工商管理（专业学位）,2014,硕士.
[41]闫素华.农村新手英语教师专业发展需求调查研究[D].曲阜师范大学,教育（专业学位）,2013,硕士.
[42]王彬彬.MIMO系统关键技术以及在未来移动通信中的应用[D].西安电子科技大学,通信与信息系统,2012,硕士.
[43]李宁.科技竞赛培养大学生创新能力研究[D].湖南科技大学,教育学,2013,硕士.
[44]卫颖涛.清代注《庄》序跋中的思想研究[D].广西师范大学,中国古代文学,2013,硕士.
[45]刘延明.美、日、中风险投资公司支撑环境比较研究[D].吉林大学,技术经济及管理,2004,硕士.
[46]戴礼飞.基于GIS和RUSLE的乌拉山区小流域综合治理[D].北京林业大学,水土保持与荒漠化防治,2013,硕士.
[47]申思.直流与双频电源联合驱动容性耦合放电的特性[D].大连理工大学,等离子体物理,2013,硕士.
[48]赵旭俊,闫宏印,吴广平,董晓丽.基于准频繁项目集的关联规则挖掘[J].太原理工大学学报,2005,04:412-415.
[49]徐庆洁.功能性微球的可控制备与表征[D].江南大学,2013.
[50]杨洋.西准噶尔额敏县前进牧场一带泥盆系研究[D].长安大学,地质工程,2014,硕士.