三甲氧基二苯乙烯的合成及其致肺动脉平滑肌细胞凋亡的研究

三甲氧基二苯乙烯的合成及其致肺动脉平滑肌细胞凋亡的研究

作者:师大云端图书馆 时间:2015-07-08 分类:期刊论文 喜欢:2034
师大云端图书馆

【摘要】目的:①对以虎杖为原料提取的Res,再经甲基化反应合成的TMS进行结构鉴定和药代动力学测定。②检测TMS对PASMCs生长抑制和致凋亡作用。方法:①用紫外吸收光谱检测、红外吸收光谱检测、1H-NMR谱检测、13C-NMR图谱检测、质谱检测等方法对TMS进行结构鉴定。②经大鼠测定TMS口服后的生物利用度,肠道吸收特点,体内组织分布和体内排泄。③经小鼠测定TMS的急性毒性。④利用大鼠肺动脉制备PASMCs。⑤用MTT法测定TMS对PASMCs增殖的影响。⑥流式AnnexinV/PI法测定TMS对PASMCs致凋亡的影响。⑦用免疫组化方法检测TMS干预PASMCs对Bax、Bcl-2表达的影响。⑧用原位杂交法检测TMS干预PASMCs对bax、bcl-2mRNA表达的影响。结果:①TMS的紫外吸收图谱为λmax(MeOH):318nm,306.2nm,217.8nm,红外光谱解析为IRvKBr/max(cm-1):2999,2935,2836,1591,1511,1456,1-NMR谱解析显示结构含有3个甲氧基,13C-NMR图谱解析为17个碳信号,并且其结构中含有对称的结构片段。质谱图谱解析为ESI-MSm/z:271[M+H]+,256[M+H-CH3]+,241[256-CH3]+,表明分子量为270,推测分子式为C17H1803,结构中含有甲基。样品元素分析得分子结构式可用C17H1803表示,结构式为因此可确定化合物为反-3,4’,5-三甲氧基二苯乙烯。②TMS绝对生物利用度为45.4%,在小肠上段有较好吸收,通过粪便、胆汁排泄,在各组织中均有分布,MTD约5.85g/kg。③TMS干预PASMCs24h后经MTT法测定显示对其生长具有显著的抑制作用,其强度呈剂量依赖性改变,较同剂量的Res作用高10多倍。A、B、C、D、E、F、G、H组的生长抑制率(%)分别为4.07±2.12,6.54±4.78,23.74±7.07,16.75±5.34,9.35±4.26,17.81±6.03,8.81±5.16,6.78±5.58。④TMS干预PASMCs24h后经流式AnnexinV/PI法检测显示对其细胞凋亡百分率(%)显著高于TNF-α干预组,其作用程度呈剂量依赖型改变,并且较Res高10多倍。A、B、C、D、E、F、G、H组的细胞凋亡百分率(%)分别为2.63±0.74,3.54±0.81,18.79±4.15,11.68±5.35,5.77±4.62,12.47±5.06,6.33±4.8,4.11±3.59。⑤TMS干预PASMCs24h后经免疫组化法检测显示其对细胞表达Bax阳性的百分率呈剂量依赖性升高,而Bcl-2阳性细胞百分率呈剂量依赖性减少,其改变较Res提高10多倍。A、B、C、D、E、F、G、H各组Bcl-2/Bax比值分别为0.99±0.24,1.07±0.22,0.744±0.37,0.844±0.41,0.92+0.32,0.86±0.45,1.02±0.42,1.12±0.51.⑥TMS干预PASMCs24h后经原位杂交法检测其对细胞呈现bcl-2mRNA阳性的百分率呈剂量依赖性减少,而baxmRNA阳性的百分率呈剂量依赖性升高,其改变较Res提高10多倍。A、B、C、D、E、F、G、H各组bcl-2mRNA/baxmRNA的比值分别为1.00±0.14,1.09±0.11,0.90+0.43,0.97±0.44,1.05±0.50,0.95±0.42,1.03±0.56,1.09±0.53。结论:①TMS的分子结构式可用C17H1803表示,结构式为,是反-3,4’,5-三甲氧基二苯乙烯。②TMS的生物利用度为45%。③TMS干预PASMCs,抑制细胞增殖,作用比Res强10多倍并且呈剂量依赖性;致凋亡作用比Res强20倍。TMS对PASMCs生长具有显著的抑制作用,其强度呈剂量依赖性改变,较同剂量的Res作用高10多倍。④TMS通过下调Bcl-2的产生和上调Bax致凋亡。
【作者】王欣;
【导师】胡建国;
【作者基本信息】中南大学,临床医学,2012,博士
【关键词】反-3,4’,5-三甲氧基二苯乙烯;肺动脉平滑肌细胞;凋亡;

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