【摘要】谷氨酸脱羧酶(glutamatedecarboxylase,GAD;EC4.1.1.15)能催化L-谷氨酸脱羧生成γ-氨基丁酸(GABA),是GABA生物制备的关键酶。同时,它还是许多微生物抗酸系统中的关键酶,对微生物维持正常的生理pH值具有重要的作用。因此,对GAD进行分子改造、研究其结构—功能关系,不仅有助于为GABA的生物制备提供性能更优越的工程酶,而且对于认识GAD的生理功能,都具 […]

【摘要】半纤维素是除了纤维素以外最为丰富的多糖,也是自然界中的第二大可再生资源,所以人们对它的主要组成成分木聚糖的降解有着广泛的兴趣。降解木聚糖的最主要的糖苷水解酶是内切-β-1,4-木聚糖酶,它可以降解木聚糖主链的β-1,4-糖苷键,产生低聚寡糖和木糖。木聚糖酶在工业上,如饲料、造纸、食品、能源、纺织等方面的应用都已经非常的广泛。为了满足不同的工业需求,发掘和研究具有不同嗜极性质(嗜碱、嗜酸、嗜 […]

【摘要】L-瓜氨酸(L-citrulline)是人体尿素循环中的一种重要代谢产物,能够吸收并清除有害的自由基从而起到抗氧化的作用。瓜氨酸是由精氨酸脱亚胺酶(ArgininedeiminaseADIEC3.5.3.6)催化产生的。目前,生产L-瓜氨酸的方法主要有：发酵法,化学法,提取法和酶法。发酵法生产的缺点是L-瓜氨酸产率低。化学法生产的产品中含有L-瓜氨酸的旋光对映体D-瓜氨酸。提取法的生产工艺 […]

【摘要】易错PCR方法,建立了含有9654个转化子的突变体库。通过三丁酸甘油酯平板透明圈法、小量发酵和大量发酵法筛选突变体库。最终获得9个突变菌株,经发酵酶活测定发现酶活最高提高到原始菌株的1.24倍,没有达到预期的效果。同时利用易错PCR方法对疏绵状嗜热丝孢菌(Thermomyceslanuginosus)脂肪酶LN进行定向进化。采用易错PCR方法,建立了含有11736个转化子的突变体库。通过筛 […]

【摘要】漆酶(laccase),是一种典型的绿色催化剂,应用范围广泛。目前工业化的漆酶商品主要来源真菌发酵。但在高温、高盐或强碱性等极端环境中,真菌漆酶易失活,限制了其应用范围。相比之下,细菌漆酶具有耐高温、耐高碱性的优势,且发酵生产周期短,具有广阔的推广前景。为获得生产周期短,活性高的细菌漆酶,本文克隆了芽孢杆菌属的漆酶基因,并在大肠杆菌中进行了原核表达,利用分子定向进化手段获得表达量高、热稳定 […]