工程菌表达可溶性半夏凝集素及其活性研究 10月30日
【摘要】半夏凝集素（Pinelliaternataagglutinin,PTA）是从传统中药半夏块茎中分离得到的一种活性物质，在分类上属于单子植物甘露聚糖结合凝集素，可以凝集兔血细胞、鼠血细胞，但不能凝集人血细胞，对多种肿瘤细胞如卵巢癌、结肠癌、肝癌等都有比较好的抑制效果，是一类发展前景较好的的潜在抗肿瘤活性成分。而从天然半夏凝集素受半夏块茎的产量限制，且有周期性，限制了以后大规模的开发和应用。故 […]
生物转化法生产谷胱甘肽的工艺研究 12月27日
【摘要】本研究对高产谷胱甘肽产生菌的选育以及对生物转化法生产谷胱甘肽的生产条件进行了探索。首先对毕赤酵母的的破壁条件进行了系统优化,通过对各种破壁方法及各种工艺参数条件下谷胱甘肽抽提率的对比,最后确定采用酸结合水浴的方式,谷胱甘肽产物的一次破出率达到95%左右。采用经过基因工程改造的GS115毕赤酵母菌株作为出发菌株,采用UV结合EMS诱变,通过筛选博来霉素抗性菌株的策略,选育得到高产菌株HS17 […]
氯丙酸脱卤酶的外分泌/可溶性表达体系的构建 12月27日
【摘要】S-2-氯丙酸脱卤酶、R-2-氯丙酸脱卤酶和3-氯丙酸脱卤酶在生物制备重要化工中间体方面具有广泛的用途。因此构建这些脱卤酶的高效重组表达具有非常重要的意义。目前脱卤酶重组表达基本都选择大肠杆菌作为宿主,在原核体系中进行重组表达存在酶活力较低、易产包涵体等不足。胞外重组表达或者选择合适的载体、宿主胞内重组表达能够较好的解决以上问题。本文构建并优化了2-氯丙酸脱卤酶的毕赤酵母外分泌表达体系。分 […]
通过优化Kex2 P1’位点在毕赤酵母中高效表达重组蛋白SCF 12月31日
【摘要】如今，重组蛋白的研究已经日趋成熟，各种蛋白表达体系也被不断完善，其中巴斯德毕赤酵母作为经典蛋白表达系统被广泛应用。毕赤酵母具有生长速率高，培养条件简单，毒性小，污染少，分泌出蛋白构象完整，活性高等优点，但其蛋白分泌水平不稳定也成为生产和科研的一大难题。本文针对酵母分泌不稳定的问题，优化了毕赤酵母Kex2P1’位点氨基酸，从而使Kex2切割信号肽的效率明显提高，大量增加毕赤酵母分泌蛋白量。为 […]
重组人血清白蛋白在组成型毕赤酵母中重组表达及中试工艺研究 07月28日
【摘要】人血清白蛋白（HumanSerumAlbumin，HSA）主要生理功能为运输功能和维持内环境相对稳定，具有抗凝血、清除自由基、维持血液正常的渗透压等功能。目前临床治疗中应用的HSA均来自人血浆提取，由于人血浆来源有限，产量远远不能满足市场需求。随着基因工程技术的发展，已有日本MitsubishiTanabePharma公司、英国DELTA公司和华北制药致力于研究并推动酵母重组表达药用HSA […]
葡萄漆酶的毕赤酵母异源表达纯化及酶学特性与功能研究 11月05日
【摘要】漆酶(EC.1.10.3.2)全称为对-二酚：(双)氧氧化还原酶,目前发现,漆酶广泛存在于真菌、细菌、植物和昆虫中。目前对植物漆酶的研究相对较少,但其在木质素合成、抗病、抗逆,及色素合成等方面研究已取得了一定的成果。葡萄(Grapes),葡萄属(Vitis)落叶藤本植物,几乎占据全世界水果产量的四分之一。葡萄的营养价值很高,其中含有大量的蛋白质、葡萄糖、果糖、酒石酸、草酸及很多微量元素。至 […]
假丝酵母（Candida sp.）99-125胞外脂肪酶的基因克隆、重组表达以及N-糖基化对脂肪酶功能影响的研究 04月09日
【摘要】假丝酵母Candidasp.99-125产生的胞外脂肪酶活性高、催化活性强,已经被广泛应用于各种酯类的合成、手性化合物的拆分和生物柴油的合成,是工业生产中重要的催化剂,为了阐明该该酶的基因和蛋白的性质,我们做了如下的工作：1.Candidasp.99-125胞外脂肪酶的分离纯化和性质分析通过丙酮沉淀、Q-sepharose离子交换层析和Butyl-sepharse疏水层析得到了纯化的Can […]
重组人死亡受体6在毕赤酵母中的表达、纯化及与淀粉样前体蛋白相互作用的研究 02月19日
【摘要】阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)是一种中枢神经系统变性病,起病隐袭,病程呈慢性进行性,是老年痴呆中最常见的一种类型。20世纪中叶以来,随老龄化的加快及AD发病率的增高,AD防治已成为全球关注热点。近年有科学研究发现：淀粉样前体蛋白(amyloidprecursorprotein,APP)和死亡受体6(Deathreceptor-6,DR6)在神经细胞自我毁灭的途径中发 […]
重组双功能水蛭素结构与功能研究及新型直接凝血酶抑制剂的设计 01月28日
【摘要】随着人们生活水平的不断提高及社会老龄化问题的日益严重,心脑血管血栓性疾病发病率和致死率非常高,是中老年人的常见病和多发病,严重威胁人类的健康。临床上常见的急性心肌梗塞、脑血栓和弥漫性血管内凝血(DIC)多数为动脉血栓,是致死或致残的主要原因之一；血液凝固异常是这一类疾病的发生、蔓延及干预中最为关键的环节。血栓性疾病在急性发病前需及早干预治疗,发病后经溶栓治疗,需要长期用药,预防血栓再次形成 […]
亚罗解脂假丝酵母脂肪酶的高水平重组表达、分子体外进化研究及其在手性拆分中的应用 01月06日
【摘要】脂肪酶(lipase,EC3.1.1.3)是一种重要的工业酶类,广泛应用于食品、油脂化工、制药和有机合成工业中,酶催化的反应具有条件温和、耗能低、原料要求低、成品质量高等优点,具有巨大的应用潜力。本实验室培育的亚罗解脂假丝酵母Candidasp.99-125所生产的胞外脂肪酶Lip2(YlLip2)活性高、催化活性强,已经被成功应用于油脂改性、多元醇酯合成、手性化合物拆分和可替代能源(生物 […]
广而告之
