【摘要】脂肪酶和脱卤酶是水解酶中重要的两大类。脂肪酶PaL能对四对外消旋薄荷醇丙酸酯进行选择性水解得到L-薄荷醇,脱卤酶dehDIV-R能对消旋2-氯丙酸进行选择性水解从而得到光学纯的S-2-氯丙酸,两酶均具有重要的应用前景。但目前其蛋白结构尚未确定,手性识别过程也不明确,对其进行结构解析和手性识别研究具有重要意义。首先利用已构建的重组菌(PaL菌株),可溶性表达脂肪酶PaL,并通过蛋白纯化条件的 […]

【摘要】本文考察了磺酸甜菜碱甲基丙烯酸酉(SBMA)对脂肪酶的活性、稳定性和构象变化的影响,以探索两性离子化合物对酶的作用。酶液中添加不同浓度的SBMA。微量(0.1mM)或者高浓度(1M)的SBMA分别可使酶活性提高25.0%、99.2%。脂肪酶的稳定性也得到明显改善。在37℃下保温96h后,游离酶液混浊,相对活性为0.310,而含1MSBMA的酶液保持澄清,相对活性为1.350。在60℃下保温 […]

【摘要】脂肪酶是一种特殊的甘油三酯水解酶,使甘油三酯水解为甘油二酯、单甘油酯、甘油和脂肪酸,脂肪酶具有催化酯交换、酯合成、酰基转移等反应的特性,所以在医药、日化、油脂加工、食品等工业领域广泛应用。20世纪90年代,许多学者开始研究用生物酶法制备生物柴油,开发出了多种用脂肪酶代替化学催化剂的转化过程。本论文采用平板透明圈法从不同地区农田、油脂污染及石油污染土壤样品中筛选出具有产脂肪酶能力的菌株87株 […]

【摘要】脂肪酶催化具有条件温和、选择性高和环境友好的优点,是国内外化学工业绿色合成的一个重要热点领域。为了开发廉价并且高效的工业固定化酶,本文研究了用天然蚕丝纤维织物固定化假丝酵母脂肪酶Candidasp.99-125及其在多种化学品合成中的应用。作为绿色化学技术中非常活跃的前沿领域,离子液体(ILs)作为“绿色”溶剂在生物合成中的应用日益广泛。本文同时研究了离子液体在脂肪酶催化的油脂加工中的应用 […]

【摘要】假丝酵母Candidasp.99-125产生的胞外脂肪酶活性高、催化活性强,已经被广泛应用于各种酯类的合成、手性化合物的拆分和生物柴油的合成,是工业生产中重要的催化剂,为了阐明该该酶的基因和蛋白的性质,我们做了如下的工作：1.Candidasp.99-125胞外脂肪酶的分离纯化和性质分析通过丙酮沉淀、Q-sepharose离子交换层析和Butyl-sepharse疏水层析得到了纯化的Can […]

【摘要】易错PCR方法,建立了含有9654个转化子的突变体库。通过三丁酸甘油酯平板透明圈法、小量发酵和大量发酵法筛选突变体库。最终获得9个突变菌株,经发酵酶活测定发现酶活最高提高到原始菌株的1.24倍,没有达到预期的效果。同时利用易错PCR方法对疏绵状嗜热丝孢菌(Thermomyceslanuginosus)脂肪酶LN进行定向进化。采用易错PCR方法,建立了含有11736个转化子的突变体库。通过筛 […]

【摘要】南极大磷虾是一类广泛分布于南极海域的多年生浮游甲壳动物，具有生物量大、分布广、营养价值高等特点，是重要的海洋蛋白新资源，同时，因其生活环境和方式的特殊性而具有产生新型生物活性物质的巨大潜力，因其潜在的渔业价值而日益受到重视。南极大磷虾生物活性物质包括酶、脂质、甲壳素、生物活性肽和紫外吸收物质等。在其体内具有非常高效的消化系统，当磷虾死后，消化酶迅速将磷虾的蛋白质、多糖等降解，这种高效的消化 […]

【摘要】表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)具有抗氧化、抗突变、防辐射、抗肿瘤、调节免疫和延缓衰老等卓越的生理活性。但是，其较高的亲水性和较低的亲脂性，极大的限制了EGCG在食品领域的应用，尤其是在油脂类食品中的应用。本文采用酶法分子修饰获得EGCG酰化产物以增加其脂溶性，通过分离纯化、结构表征，明确其酰化位点及最终产物结构，并对酰化产物的脂溶性和抗氧化性能进行评价。首先，确立了酰化EGCG酶法合 […]

【摘要】家蚕是一类重要的经济资源昆虫,在国民经济中占有重要地位,而蚕病的发生一直困扰着蚕桑业的发展,尤其是家蚕核型多角体病毒病(BmNPV),它是蚕业生产中危害最为严重的一种病毒病。家蚕在长期的进化过程中,逐渐形成了些自我保护的免疫防御机制。日本学者发现家蚕中肠分泌的脂肪酶对BmNPV且有强的抑制作用,国内一些学者克隆了家蚕肠道脂肪酶基因,发现其表达产物对BmNPV也有抑制作用。本研究室向芸庆等发 […]

【摘要】脂肪酶(EC3.1.1.3)是能够将长链脂酰甘油酯水解的一类酰基水解酶，不仅能在油水界面催化水解反应，还可以在疏水介质中催化转酯、酯化、酯交换等反应。根据脂肪酶的底物专一性，可以将其分为三脂酰甘油脂肪酶和单双脂酰甘油脂肪酶等。三脂酰甘油脂肪酶能将三脂酰甘油酯水解为脂肪酸和甘油，而单双脂酰甘油脂肪酶只能水解单脂酰甘油酯和二脂酰甘油酯。圆弧青霉(Penicilliumcyclopium)PG3 […]